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肿瘤标志物筛选策略与新肿瘤标志物.ppt

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肿瘤标志物筛选策略与新肿瘤标志物.ppt

上传人:qingqihe 2022/5/15 文件大小:13.46 MB

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肿瘤标志物筛选策略与新肿瘤标志物.ppt

文档介绍

文档介绍:肿瘤标志物 肿瘤细胞所产生或分泌的某种蛋白质或其它物质,与肿瘤的存在和发展密切关系。 可用于肿瘤的筛查、诊断、治疗疗效监测和预后判断。
常见分类法:
蛋白类
糖蛋白类
酶类
激素类
核酸类
寻找新的肿瘤标志物
研究标本


研究使用的方法技术
1. 组织芯片
2. 基因芯片
3. 蛋白质差异表达比较
4. 单克隆抗体技术
差异比较
当前9页,共32页,星期日。
第九页,共三十二页。
组织芯片
是生物芯片技术的一个重要分支,是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载玻片上,进行同一指标的原位组织学研究。
当前10页,共32页,星期日。
第十页,共三十二页。
①选取所需蜡块,常规切片做HE 染色,显微镜下
确定目标区并做定位标记。
1  组织芯片制备过程
当前11页,共32页,星期日。
第十一页,共三十二页。
②采用组织芯片仪在受体蜡块上打孔,并精确排成 微孔阵列。
③在做标记的蜡块上钻取组织柱,按设计方案移到 受体蜡块上。
当前12页,共32页,星期日。
第十二页,共三十二页。
④把设计好的蜡块放入温箱,根据蜡质,调定温箱
温度,在半融状态下取出,室温冷却,放入4 ℃冰
箱中备用。
⑤借助特定切片辅助系统—粘着包被带卷片系统,
对组织芯片蜡块连续切片。切片厚度2~ 3μm ,
一般可切片50~100 张。
当前13页,共32页,星期日。
第十三页,共三十二页。
当前14页,共32页,星期日。
第十四页,共三十二页。
各种不同低、中、高密度组织芯片
1,2是低密度组织芯片(组织点<200)。3,4,5,6是中密度组织芯片(组织点200-600)。7,8是高密度组织芯片(组织点>600)
当前15页,共32页,星期日。
第十五页,共三十二页。
基因芯片
基因芯片的测序原理是杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法,在一块基片表面固定了序列已知的核苷酸的探针。
当前16页,共32页,星期日。
第十六页,共三十二页。
DNA芯片
当前17页,共32页,星期日。
第十七页,共三十二页。
6400点的基因芯片
(面积 12X14 mm)
当前18页,共32页,星期日。
第十八页,共三十二页。
蛋白质差异表达比较
二维电泳
蛋白质比较研究的质谱相关技术
SELDI蛋白质芯片技术
当前19页,共32页,星期日。
第十九页,共三十二页。
proteomics
(表达蛋白组学)
The study of global changes in protein expression
Proteomics
-map proteomics
(细胞图谱蛋白组学)
The systematic study of protein-protein interactions through the isolation of protein complexes
蛋白质差异表达比较
当前20页,共32页,星期日。
第二十页,共三十二页。
双向凝胶电泳是利用不同蛋白质的物理、化学性质的差异,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上展开。
第一向等电聚焦: 等电点
第二向SDS-PAGE:分子量
二维电泳
当前21页,共32页,星期日。
第二十一页,共三十二页。
当前22页,共32页,星期日。
第二十二页,共三十二页。
蛋白质比较研究的质谱相关技术
基质辅助激光解吸电离技术MALDI (Matrix-assisted laser desorption/ionization)
电喷雾电离质谱术 ESI ( Electrospray ionisation )
当前23页,共32页,星期日。
第二十三页,共三十二页。
单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖,又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。
单克隆抗体技术
当前24页,共32页,星期日。
第二十四页,共三十二页。
当前25页,共32页,星期日。
第二十五页,共三十二页。
单克隆抗体技术
,得到的杂交瘤细胞产生的抗体,反过来寻找抗原。

当前26页,共