文档介绍：实验一细胞形态细胞器的显微结构的观察演示文稿
第一页，共三十五页。
一、实验目的
，掌握光学显微镜的使用方法。
。
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镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积，
公式为: M = K1xK2
焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时，不仅是这一物点，而且它的
上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全
厚度，必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。
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厚标本和薄标本
4 - 5 um
2um
基础知识
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基础知识
三、显微镜概述
显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。

普通生物显微镜由3部分构成：
①照明系统：包括光源和聚光器。
②光学放大系统：由物镜和目镜组成，
是显微镜的主体。
③机械装置：用于固定材料和观察方便，
包括镜台(载物台) 、调节器和、
物镜转换器(旋转器)等。
尼康E-600显微镜
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（可直接进行解剖及观察并具有正像立体感）
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尼康E800荧光DIC显微镜
荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色）
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荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别：
，即光源通过物镜投射于样品上。
，波长较短，分辨力高于普通显微镜。
，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人目。
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4. 激光共聚焦扫描显微镜（具有高分辨率可进行显微断层扫描）
LCSM照片
蓝色为细胞核，绿色为微管
（能观察活细胞）
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暗视野显微镜（dark field microscope）的聚光镜中央有当光片，使照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至 4-200nm的微粒子，分辨率可比普通显微镜高50倍。

一种介壳虫的染色体
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7. 偏光显微镜（对于双折射物质进行结构研究）
偏光显微镜（polarizing microscope）用于检测具有双折射性的物质，如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。
（图像具有浮雕感）
DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比，其标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。
DIC显微镜下的硅藻（伪彩色）
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9. 倒置显微镜（组织培养中长工作距离的）
组成和普通显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在载物台之上（右图），用于观察培养的活细胞，具有相差物镜。
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10. 显微操作技术
尼康NT-88NE显微操作/注射仪
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四、实验用品
各种组织切片
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五、实验步骤
(一)显微镜的使用
1. 观察前的准备工作
(1)观察者要养成显微镜镜检的工作****惯，观察时要双
眼同时睁开，一边观察一边进行记录或描绘。
(2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。
(3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整
和正常，并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透
镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。
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瞳距调节
2. 显微镜的调节
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屈光度调节
调节
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粗调松紧调节旋钮
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聚光镜中心调节
⑤ 光轴中心调节螺钉
③ 视场光栏
③ 孔径光栏
②10X物镜
① 标本
④ 聚光镜升降旋钮
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孔径光栏调节
=(-)
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孔径光栏开度与图象