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实验一细胞形态细胞器的显微结构的观察演示文稿.ppt

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文档介绍:实验一细胞形态细胞器的显微结构的观察演示文稿

第一页,共三十五页。



一、实验目的
1.了解普通光学显微镜的工作原理,掌握光学显微镜的使用方法。
2.熟悉光学显微镜下细胞的基本形态与结构。
第二页,共三十五页。

镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积,
公式为: M = K1xK2
焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时,不仅是这一物点,而且它的
上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全
厚度,必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。
第七页,共三十五页。


厚标本和薄标本
4 - 5 um
2um
基础知识
第八页,共三十五页。


基础知识
三、显微镜概述
显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。
1.光学显微镜
普通生物显微镜由3部分构成:
①照明系统:包括光源和聚光器。
②光学放大系统:由物镜和目镜组成,
是显微镜的主体。
③机械装置:用于固定材料和观察方便,
包括镜台(载物台) 、调节器和、
物镜转换器(旋转器)等。

尼康E-600显微镜
第九页,共三十五页。


2.体视显微镜(可直接进行解剖及观察并具有正像立体感)

第十页,共三十五页。



3.荧光显微镜
尼康E800荧光DIC显微镜

荧光显微镜照片(微管呈绿色、微丝红色、核蓝色)
第十一页,共三十五页。


荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:
1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上。
2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜。
3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人目。
第十二页,共三十五页。




4. 激光共聚焦扫描显微镜(具有高分辨率可进行显微断层扫描)
LCSM照片
蓝色为细胞核,绿色为微管

(能观察活细胞)
第十三页,共三十五页。


5.暗视野显微镜
暗视野显微镜(dark field microscope)的聚光镜中央有当光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至 4-200nm的微粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。
6.相差显微镜

一种介壳虫的染色体
第十四页,共三十五页。


7. 偏光显微镜(对于双折射物质进行结构研究)
偏光显微镜(polarizing microscope)用于检测具有双折射性的物质,如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。
8.微分干涉差显微镜(图像具有浮雕感)
DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比,其标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。

DIC显微镜下的硅藻(伪彩色)
第十五页,共三十五页。




9. 倒置显微镜(组织培养中长工作距离的)
组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物台之上(右图),用于观察培养的活细胞,具有相差物镜。
第十六页,共三十五页。


10. 显微操作技术

尼康NT-88NE显微操作/注射仪
第十七页,共三十五页。


四、实验用品
各种组织切片
第十八页,共三十五页。



五、 实验步骤
(一)显微镜的使用
1. 观察前的准备工作
(1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要双
眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。
(2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。
(3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整
和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透
镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。
第十九页,共三十五页。


瞳 距 调 节
2. 显微镜的调节
第二十页,共三十五页。


屈 光 度 调 节
调节
第二十一页,共三十五页。


粗 调 松 紧 调 节 旋 钮
第二十二页,共三十五页。


聚 光 镜 中 心 调 节
⑤ 光轴中心调节螺钉
③ 视场光栏
③ 孔径光栏
②10X物镜
① 标本
④ 聚光镜升降旋钮
第二十三页,共三十五页。


孔径光栏调节
N.A聚=(0.6-0.8)N.A物
第二十四页,共三十五页。


孔径光栏开度与图象

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上传人:qinqinzhang 2022/5/19 文件大小:7.80 MB

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