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消毒液消毒效力及有效期验证.docx

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文档介绍:消毒液消毒效力及有效期验证


































消毒液消毒效力及有效期验证方案






目的
本文件用内,再吸加0.5ml菌悬液,混匀,作用10分钟,吸取该最终样液0.5ml,用稀释液做10倍系列稀释至10-3,取相应稀释级各0.5ml,分别接种于平皿中,做活菌培养计数。
●第6组
目的:作为阴性对照用。
操作方法:分别吸取稀释液与中和剂各0.5ml于同一无菌小平皿内,倒入上述试验同批次的培养基15ml~20ml,培养观察。如出现细菌生长,可能提示试验材料或操作过程中有污染,应重新进行试验。
样品培养:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌于30~35℃培养3天,白色念珠菌于20~25℃培养5天,培养结束后点计菌落数。
结果判定:
第6组无菌生长
第3、4、5组有相似菌落数生长,其每组间菌落数误差率不超过15%,计算公式如下:

消毒液消毒效力及有效期验证方案






误差率=3组间菌落平均数-各组菌落平均数的绝对值之和3×3组间菌落平均数×100%
第1组无菌生长或仅有少数试验菌菌落生长
第2组菌落数比第1组菌落数多,但比第3、4、5组菌落数少,且符合下表要求
表 3
第1组平板平均菌落数
第1组平板平均菌落数
0
>5
x
>(X+5)
y
>(y+0.5y)
以上条件均符合要求时,判断所选中和剂及其浓度合格。
定量悬浮试验
试验目的:通过浸泡或液封消毒的消毒剂应通过定量悬浮试验,确定其消毒效力是否符合要求。
操作:将含菌量为1×108~5×108cfu/ml的菌悬液0.5ml加入到10ml的消毒剂溶液中,作用5分钟、10分钟、15分钟、20分钟后,取消毒剂与细菌混合样品0.5ml,接种于4.5ml中和剂中,中和10分钟后,10倍稀释稀释至10-4,取各稀释级1ml分别接种于平皿中,每个浓度平行2个平板。阳性对照以0.9%***化钠溶液代替消毒液,同法操作。

消毒液消毒效力及有效期验证方案






样品培养:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌于30~35℃培养3天,白色念珠菌于20~25℃培养5天,培养结束后点计菌落数。
结果计算:计算试验组和对照组的活菌浓度(cfu/ml),并换算为对数值(N),并按下式计算杀灭对照值
杀灭对数值(KL) = 对照组平均活菌浓度的对数值(NO)-试验组活菌浓度对数值(NX)
可接受标准:杀灭对数值(KL)应不低于3~5个对数单位。
表面试验法
试验目的:通过擦拭消毒的消毒剂应通过表面试验法,确定其消毒效力是否符合要求。
染菌不锈钢载片制备
将经灭菌的载片平铺于无菌平皿内,滴加金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌,含菌量为1×108~5×108cfu/ml的菌悬液0.1ml,并均匀涂布于整个载体表面。滴染菌液后,载片置超净工作台晾干后备用,每种菌平行制备两个染菌不锈钢载片。
染菌玻璃载片制备
因培养皿的材质为玻璃,故用培养皿代替玻璃载片进行染菌试验。进行菌液滴染前,用记号笔在培养皿菌液滴染面的背面画出染菌面积

消毒液消毒效力及有效期验证方案






(50mm×50mm),标注清晰,菌液滴染操作同染菌不锈钢载片制备。
操作
●试验组:将消毒剂擦拭在制备好的染菌载片上,消毒剂作用时间分别为5分钟、10分钟、15分钟、20分钟,作用结束后,用接触碟取样,金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌用TSA接触碟取样,白色念珠菌用SDA接触碟取样。
接触碟取样方法:打开接触碟盖,使培养基表面与取样面直接接触,均匀按压接触碟,确保培养基表面与取样表面均匀接触10秒左右,再盖上碟盖。
●对照组:对照组的活菌浓度计数见表9菌落计数表。
●阴性对照:用接触碟在已灭菌未染菌的载片上按压取样,操作同上,每种载片及每种接触碟平行制备两个平皿。
样品培养:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌于30~35℃培养3天,白色念珠菌于20~25℃培养5天,培养结束后点计菌落数。
结果计算:计算试验组和对照组的活菌浓度(cfu/ml),并换算为对数值(N),并按下式计算杀灭对照值
杀灭对数值(KL) = 对照组平均活菌浓度的对数值(NO)-试验组活菌浓度对数值(NX)
可接受标准:杀灭对数值(KL)应不低于3~5个对数单位。

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模拟现场消毒实验
擦拭区域:微生物检验室不锈钢工作台面、墙面、超净工作台的台面三个区域的表面微生物

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上传人:布罗奇迹 2022/5/19 文件大小:1011 KB

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