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货号：MS2415 规格：100管/48样
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase ，LPL）试剂盒说
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货号：MS2415 规格：100管/48样
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase ，LPL）试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。
测定原理：
脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制：
试剂一：液体105mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体4mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
样品处理：
组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（，加入1mL试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
细胞：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一）加入试剂一，冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
血清：直接测定。
测定操作：
对照管
测定管
样品（μL）
20
20
试剂一（μL）
80
试剂二（μL）
80
混匀，45℃水浴10min
试剂三（μL）
100
100
充分混匀，25℃静置2min，于微量石英比色皿/96孔板，测定400nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管- A对照管
计算公式：
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y= -，R2=
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在45℃，，每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol 4-硝基苯酚为一个酶活力单位。
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LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+）÷ ×V反总÷（V样×Cpr）÷T
= ×（△A+）÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：在45℃，，每克组织每分钟水解产生1μmol 4-硝基苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/g 鲜重）=（△A+）÷×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T
= ×（△A+）÷W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：在45℃，，每104个细胞每分钟水解产生1μmol 4-硝基苯酚为一个酶