文档介绍:(带格式的:两端对齐
国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数
实验目的
实验原理:国标法操作的原理
实验器材:
培养箱,10只移液管,250ml锥形瓶,5只大试管,试 管架,4个平皿,500ml大烧杯1个,电子天平,纱布,脱脂 棉,灭菌
(带格式的:两端对齐
国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数
实验目的
实验原理:国标法操作的原理
实验器材:
培养箱,10只移液管,250ml锥形瓶,5只大试管,试 管架,4个平皿,500ml大烧杯1个,电子天平,纱布,脱脂 棉,灭菌锅,PH计或PH试纸,电炉,石棉网,铁架台,100ml 量筒,橡皮手套,超净台
实验药品:
磷酸盐缓冲液,蒸馅水,LB培养基,琼脂,5%NaOH, 5%HC1
实验步骤:
10只移液管,12-H 250ml锥形瓶,5只大试管,试管架,4多个平皿, 500ml大烧杯1个,100ml量筒进行洗涤,然后一起放入高压益灭 菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。灭完菌后烘干,完成后放入 超净台中。
用酒精灯擦拭超净台,紫外消毒30min
1:用电子天平称取成品LB3. 1241g和琼脂1. 8756g放入250ml的洁 净锥形瓶中。
2:用量筒量取125ml的蒸馅水加入该锥形瓶中,制成培养基。
3:用棉花堵住该锥形瓶的瓶口,用牛皮纸包住瓶口,用橡皮筋扎牢, 再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20mino
4:灭完菌后放入超净台中备用。
—:
1:取1只无菌250ml锥形瓶,用量筒向其中加入49ml PBS
2:将1ml样品加入到该锥形瓶中,摇匀制成1:50的细菌溶液。
3:取4只试管,编号1—4
4:用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS
5: 菌液均匀。
6:用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试 管中,摇匀
7:用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取1ml细菌溶液,加 入3中,摇匀 以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9:取4只平皿,编号1—4
10:分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取1 m 1的菌液置于4 只平皿中,加入4 5 — 5 0摄氏度温度下的培养基,约1 5 mm厚度。 缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀;待培养基冷凝后倒置。
11:将培养基在3 6摄氏度条件下培养12小时。
12:取出培养皿,选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的 个数。
四:实验结果(记得在操作过程和得到结果时拍照)
1号,2号菌落个数多不可计,舍弃
4号平皿中菌落数目小于10 cfu ,舍弃
3号平皿中菌落分布较均匀,数3号中的菌落数,一共有210个cfu o
计算样品中细菌浓度为: X 105 Cfu/ml 点评 超净台中的实验步骤讲述详细,明确,不错。前面的步骤叙述有点乱, 建议按照如下标题重新调整顺序。
实验步骤:
1、仪器清洗
带格式的:编号+级别:1 +编号样式:1, 2, 3, -+起始编号