文档介绍：第二篇
色谱分析技术
一、色谱法的起源、发展及定义
概 述
一、色谱法的起源、发展及定义
柱色谱→薄层色谱和纸色谱→气相色谱→毛细管柱
色谱→高效液相色谱→薄层扫描仪→毛细管电泳→色谱-光谱联用、多维一原理可以对吸附剂进行活化（去水）和脱活化（加水）处理，以控制吸附剂的活性。
硅胶、氧化铝的含水量与活性级别
活性等级
I
II
III
IV
V
氧化铝加水量 /%
0
3
6
10
15
硅胶加水量 /%
0
5
15
25
38
硅胶、氧化铝薄层：被分离物质极性越大，越易被吸附。
一般规律：
（1）官能团极性越大，整个分子极性越大，越易被吸附；
（2）形成分子内H键时，被吸附力减弱；
（3）同系物中，分子量越大，极性越小，被吸附力越弱。
常见官能团极性顺序：
烷烃<烯烃<醚类<硝基化合物<酯类<***类
<醛类<硫醇<***类<醇类<酚类<羧酸类
被分离物质极性与吸附能力的关系
（二）展开剂（流动相）的选择
硅胶、氧化铝薄层：展开剂的极性越大，其展开能力越强，化合物在色谱中移动的速度就越快，表现为Rf 增大。
常用溶剂极性大小
石油醚＜环已烷＜四***化碳＜苯＜甲苯 ＜***＜三***甲烷（***仿）＜乙酸乙酯＜正丁醇＜***＜乙醇＜甲醇＜水
选择原则：
被分离成分极性大展开剂极性大
被分离成分极性小展开剂极性小
吸附剂、展开剂选择规律
考虑三方面因素：被分离组分极性，吸附剂活性、洗脱剂极性。
活泼
不活泼
吸附剂
（固定相）
展开剂
（流动相）
被分离物质
B
B’
A
C
C’
极性
非极性
非极性
极性
A’
Ⅴ
Ⅰ
硅胶薄层色谱规律总结
被分离组分
极性
展开剂
极性
吸附剂
活性
Rf
被分离物洗脱顺序
大
大
弱
小
后洗脱
小
小
强
大
先洗脱
第二节 薄层色谱系统简介
第三节 操作方法及注意事项
略：在操作方法中部分介绍
一、仪器的性能检定
二、背景干扰的消除
三、样品测定操作方法
1、薄层板的制备 2、点样
3、展开 4、显色和定位
5、薄层扫描仪对斑点扫描
1、薄层板的制备
要求：玻璃板需光洁，否则吸附剂易脱落；
大小由需求决定。
薄层板分类和制法
软板的制备
硬板的制备 倾注法
平铺法
机械涂布法
1、薄层板的制备
（1）软板的制备
软板：直接将吸附剂铺在玻璃板上制成，不加粘合剂
要求：厚度→随分离要求而定，～
玻璃棒推动速度不宜过快、也不应停顿→影响厚度均一性
优点：方法简便、随用随铺、展开速度快。
缺点：吸附剂易脱落、只能用近水平展开，效果差。
薄层板分类和制法
软板的制备
硬板的制备 倾注法
平铺法
机械涂布法
1、薄层板的制备
（2）硬板的制备
硬板：吸附剂加粘合剂制成的板
常用的粘合剂：煅石膏（Ｇ）
机械强度差，易脱落，但不易腐蚀
羧***纤维素钠（CMC-Na）
机械强度好，不易脱落，但易腐蚀且
a、倾注法：
硅胶G或氧化铝G，直接加水调成糊状
硅胶或氧化铝，加羧***纤维素钠水溶液调成糊状
倒在玻璃板上
均匀铺开、振荡、晾干、活化、置干燥器中备用。
（2）硬板的制备
b、平铺法：
1. 吸附剂薄层 2. 涂布器 3. 玻璃夹板
4. 玻璃板 5. 玻璃夹板
过程：制板→振荡→晾干→活化→备用
优点：一次铺多块薄层板，简单易行。
（2）硬板的制备
c、机械涂布法：
优点：简单方便、薄板厚度均匀、分离效果好。
手动涂布器 全自动涂布器
常用的薄层板：
软板：硅胶H板、氧化铝H板
硬板：常用的有硅胶G板、氧化铝G板、硅胶CMC-Na板、氧化铝CMC-Na板、硅胶GF<[254]> 、硅胶GF<[356]>
2、点样
（1）样品溶液的制备：
怎样选择溶剂？
水可以用吗？
2、点样
（2）点样量：
与薄层板的关系
太多太少的影响
点样基线：
样点直径：2-4mm
点间距离：-
2、点样
（3）点样方法：
划线、样品记号点、点样
注：动