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奥林巴斯IX73倒置荧光显微镜使用说明FudanUniversity.doc

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奥林巴斯IX73倒置荧光显微镜使用说明FudanUniversity.doc

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奥林巴斯IX73倒置荧光显微镜使用说明FudanUniversity.doc

文档介绍

文档介绍:复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室
奥林巴斯IX73倒置荧光显微镜使用说明
本内容主要分为以下几个章节:
一、明场方式的使用说明
二、相差方式的使用说明
三、微分干预(DIC)方式的具窗口中切换相机芯片为“灰度模式”即黑白渐进按钮,此时相机自动切换为黑白芯片进行荧光图像采图;接下来勾选高级荧光模式“SFL”;
4.随后点击“实时察看”对荧光图像进行预览,将曝光模式调节为
“自动”,根据荧光表达的强弱,能够将曝光模式切换到“自动”,
经过增加曝光时间来使得荧光表达更亮,反之亦然;若调节曝光时间
超过1s,能够适合调高“增益”值(默认是1,能够调节到2)来使得
更短的曝光时间达到相同的荧光明度;
5.如果感觉荧光样品的背景不够洁净,能够履行黑平衡操作,点击
“黑平衡”后框选预览图像中荧光样品之外的背景地区,即可履行黑
平衡;
6.根据实验需求,调节拍照的分辨率后点击“拍照”即可达成对当
前预览图像的实时拍照,随后点击“图像”>“印入信息”>并选择
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复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室
“是”之后再对该图像进行保存,这样荧光图像为彩色,否则是黑白颜色的图片;图像默认保存格式为“TIF”格式。
标尺的增添
如果要在软件上显示并保存标尺信息,可在进行图像预览时点击“视图”>“标尺”,标尺就会在图像上显示出来;
随后点击“拍照”,拍照达成后,再点击“图像”>“印入信息”>并选择“是”之后再对该图像进行保存,标尺信息就会印在该图像上;
如果改变标尺格式可选“工具”>“选项”>“标尺”。
六、图片组合的使用说明
荧光图片的组合
多通道荧光自动叠加
将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口;
选定“自动办理”选项;
单击“多通道”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内部的充分浅黄色的背景;
单击增添通道按钮,上下文菜单随即被翻开;该上下文菜单中将
列出所有目前软件设置的观察模式(FUW、FBWA、FGW、CY5等荧光观察模式);
5.选定首先要采集的色彩通道,比如蓝色“FUW”,随后单击第一个
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复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室
色彩通道旁边的小加号,激活目前蓝色通道,并按软件提示将滤色块
转盘转至1号位;
6.随后将工具窗口切换至“摄像控制”工具窗口,点击“实时察看”
对荧光样品进行曝光时间及增益值进行调节,达到一个最正确的察看效
果;然后切换至“流程管理”工具窗口,单击读取设置按钮,将最正确
察看效果时的曝光时间及增益值读取到目前所激活的荧光通道;
7.后边能够重复操作第4-6步,增添想要与目前已激活通道(例:
蓝色通道)组合的其他荧光通道;
8.在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,随后软件中会提示你切
换滤色块的指令,每当你按照软件提示切换一个滤色块,相机就拍一
张荧光图像,指令提示完成后,软件自动将不同通道下拍摄的多张荧
光图像进行荧光叠加,图像窗口中将显示所有通道的叠加荧光图像;
9.将多通道荧光图像另存为指定文件夹,默认的文件保存格式为
“TIF”格式。
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复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室
多通道荧光手动叠加
多通道图像:用黑白相机芯片所拍出的荧光图像,该图像在软件
中已默认增添并使用了相应通道的伪彩色,此时图像模式为“多通道,
位图像”。
鼠标选中随意一张多通道图像文件名后,点击图像>组合通道,组合通道对话框随即翻开;
选中的多通道图像将作为第一色彩通道被自动输入到图像列表中,组合通道对话框中显示出目前色彩通道图像的预览图像;
在下一可用行中,单击图像单元格。随即会出现一个可用图像的文件名列表,表中包含所有的可用图像。此时从表格中单击选中另一可用多通道图像后,组合通道对话框中立刻显示组合好的预览图像;
在列表里鼠标选中任一色彩通道图像文件名,可进行该通道色彩亮度值的调节,增加该色

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