文档介绍：动物基因工程课程论文
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二O一一年五月八日
基因工程抗体研究进展及其临床应用
摘要：基因工程抗体是继多克隆抗体和单克隆抗体之后的第三代抗体，近年来随着生物工程技术制备单抗成功
20世纪90年代初，。
重组抗体的体积越来越小，或被重新构建成多价分子，或与其它分子相融合，如放射性核素、毒素、酶、脂质体和病毒【5】。重组技术的出现使筛选、人源化、抗体的生产得到革新，并取代杂交瘤技术，从而使以抗体为基础的药剂设计成为可能。
成粉复杂，副反应严重
动物多克隆抗血清
'被抗生素所代替
HAMA反应
——鼠源单克隆抗体*
“魔弹出
分子生物学基因工程技术
抗体工程就是指利用分子生物学、
鼠源抗体的人源化
及形式蚤样的改造抗体
、
宜核细胞中表达制备的工程技术"
图1：抗体的发展

主要是利用基因重组技术，把鼠抗体的重轻链可变区部分与人抗体重轻链恒定区的进行重组，减少鼠源结构，增加人源结构，而保持抗体与原抗原的特异性结合【6】。
首先把小鼠编码Ig重轻链的基因剔除。
制备表达人的Ig重轻链的转基因小鼠。
上二种小鼠回交，获得只表达人Ig重轻链的基因的小鼠。当用抗原免疫后，小鼠可产生完全人源抗体。
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人的Ig重轻链可变区基因片段展示在噬菌体表面，组成抗体库。
过噬菌体把抗体的表型和基因型相偶联，易进行分子克隆和基因操作。
3•抗体库的来源影响筛选结果（免疫和正常人）。
4•高通量筛选与抗原结合的抗体，但亲和力低。

由于骨髓瘤细胞稳定性高和融合率高，所以要建立好的人骨髓瘤细胞。

用EB病毒将人淋巴细胞永生化可产生分泌抗体的B细胞克隆【7】。这一技术较为成熟，但是存在抗体分泌不稳定的缺点，限制了其应用。或直接分离分泌抗体的B细胞,用PCR获得重轻连，构建全人抗体。

FDA已批准上市的抗体药物。
（中国）已批准上市及临床研究的的抗体药物。

免腹性疾珈
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图2:单抗体市场的预测与分析

随着生物工程技术的发展，许多基因工程抗体陆续问世，并在医学领域的许多方面都具应用潜力，如病毒感染、肿瘤、自身免疫性疾病、同种异体移植物注射、哮
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喘、中风和青光眼治疗，尤其在诊断和治疗肿瘤性疾病及抗感染方面优势明显。

放射性标记抗体在肿瘤影像和治疗中很重要，并可有效进行药代动力学评估．以标记抗体注入人体内显示肿瘤部位抗原与抗体结合的放射浓集称放射免疫显像，由于基因工程抗体如单链抗体、Fab片段等分子量小、能很快清除、组织穿透力强，所以更适于放射免疫显像【8】。
恶性肿瘤的导向治疗，是通过重组技术将抗肿瘤相关抗原的抗体与多种分子融合，这些分子在抗体结合靶分子后可提供重要辅助功能．这些分子包括：放射性核素、细胞毒药物、毒素、小肽、蛋白、酶和用于基因治疗的病毒．对肿瘤治疗来说，设计的双特异性抗体可有效针对低水平的肿瘤相关抗原，并将细胞毒物质输送到肿瘤细胞•此外，抗体还可与携带药物的脂质体、各种PEG偶联，从而增强体内运输和药代动力学。作为免疫脂质体，转铁蛋白受体抗体可使药物通过血脑屏障到达大脑．抗体酶复合物作为前体药物也被用于基础肿瘤治疗。

预防和治疗感染性疾病常用的药物是疫苗和抗生素，但对于一些尚无有效预防及治疗手段的感染性疾病如SARS、AIDS等，抗体治疗可做为首选方案。如在治疗AIDS方面，利用抗体工程技术已成功地制备出HIV病毒整合菌的单链抗体ScAb2219，对HIV病毒感染的早期和晚期具有有效的抑制作用，并可望成为S基因治疗的有效手段。呼吸道合胞病毒（RSV）易引起婴儿呼吸道疾病，如细支气管炎和肺炎，并可引起严重的并发症，目前已有人源化单克隆抗体Palivizumab经美国FDA批准上市，临床实验证明无毒、副反应，并可显著降低婴儿的住院率。我国率先建立了针对SARS的基因工程抗体库，这对于SARS的预防、诊断和治疗都将起到重要作用和深远影响。对于中和其它病原分子，FDA已批准Fab单体分子作为抗蛇毒药物；scFv片段和寡克隆复合物作为抗细菌毒素药