文档介绍:: .
EB伴有疼痛、听力
下降,患者自行去宁远当地医院做检查,因未发现异常,未作特殊处
理。后疼痛未见缓解,遂予以前往我院就诊,行 CT 考虑鼻咽部占位,
拟“鼻咽壁恶性肿瘤”收入院治疗。起病以来患者精神状态较差,纳
差未进食,无大小便失禁。为进一步明确是否为 EB 病毒感染所致的
鼻咽癌,临床科室申请 EB 病毒检测。
标本类型:血液
标本采集及要求:
①采集标本前应按照操作规范仔细核对患者的姓名、性别、年龄及检
查项目。
②用普通红色真空管(不含抗凝剂)或含有分离胶的真空管采血至少
3毫升。采血前禁止用药、需要心平气和禁止运动;抽血前一天需要
饮食清淡,勿食油腻、勿吸烟、酗酒,睡眠充足不熬夜。
标本接收:由专业人员及时送检,尽量减少误差
①接收前:查看血液标本是否符合检验要求。对不合格的标本如有血凝块或标本量不足、标本有严重溶血或脂血这些情况的话应与临床联
系询问原因,一同协商处理。
②接收后:已接收样本中,发现不合格样本时,查看患者检查的项目,
考虑是否有退回重抽的必要,若有必要需通知该科室负责人重新抽
取。
标本处理:
①对合格的标本应尽快分离血清或血浆,转速不宜太快以避标本发生
溶血,血清标本最好及时检测。对于不能立即测定的标本离心后放入
2~8℃的冰箱里保存,于2~3天内完检验。
②标本送到科室,接收后。需要放入离心机中配平离心 7min,转速
4000r/min,离出血清或血浆,待离心机停止后取出标本。
③编号、扫描到电脑里面。
标本检测流程:
仪器准备:ST360 酶标仪、半自动洗板机、生物安全柜、孵育
箱等。
试剂及材料准备:
①同昕生物技术(北京)有限公司生产的 EB 病毒核衣壳抗原(VCA)
IgA 抗体检测试剂
②同昕生物技术(北京)有限公司生产的 EB 病毒早期抗原(EA)IgA
抗体检测试剂
③同昕生物技术(北京)有限公司生产的 EB 病毒 Rta 蛋白抗体 IgG
检测试剂④一次性的橡胶手套、一次性的薄膜手套、加样枪、加样枪枪头、废
液桶。
检验原理:
①(VCA)IgA 抗体检验原理:是采用的间接酶联免疫吸附测法去检
测人血清中 EB 病毒 VCA-lgA 抗体。首先在微孔条上包埋纯度较高的
EB 病毒基因的重组 EB 病毒 VCA 抗原与血清标本中 VCA-lgA 抗体结合,
然后再加入用酶 HRP 所标记的羊抗人 IgA 就能与重组 EB 病毒 VCA 抗
原发生抗原抗体的特异性结合,形成稳定的被酶所标记过的-抗原抗
体复合物,当我么加入底物时就可以催化底物(TMB)显色,最后当
我们加入终止液时整个免疫反应终止。反应终止后我们就可以通过酶
标仪检测吸光度(A 值),对 EB 病毒抗原(VCA)IgA 抗体进行定性、
定量分析,然后根据参考范围就可以对检验结果进行分析、解释。
②(EA)IgA 抗体检验原理:也是采间接酶联免疫吸附方法来检测
人血清中 EB 病毒 EA-IgA 抗体。在微孔条上预包埋高纯度基因重组
EB 病毒 EA 抗原就可以和血清样品中 EA-IgA 抗体发生抗原抗体的特
意性结合,然后再加入用酶(HRP)所标记的羊抗人 IgA 就能与抗原
抗体复合物进一步结合,形成稳定的被酶所标记过的 HRP-抗原抗体
复合物,当我们加入底物时就可催化底物(TMB)显色,最后当我们
加入终止液就会使反应终止。反应终止后我们就可以通过通过酶标仪
检测吸光度(A 值),对 EB 病毒(EA)IgA 抗体进行定性、定量分析,
然后根据参考范围就可以对检验结果进行分析、解释。