微量凯氏定氮法测定蛋白质含量实验报告.docx

文档介绍：微量凯氏定氮法测定蛋白质含量实验报告
微量凯氏定氮法测定蛋白质含量实验报告
一、实验目的

（未知样品的消化、蒸馏、滴定及其含氮量的计算等）
二、实验原理 ① 用移液管分别吸取2ml蒸馏水按上述操作步骤进行蒸馏。
L
H
仪器的洗涤：

（1）蒸馏完毕，用微量酸式滴定管， 盐酸标准溶液进行滴定锥瓶内溶液，溶液由蓝绿色变为淡紫色或灰色，即为终点。
（2）记录所用盐酸的量。

若测定的样品含氮量部分只是蛋白质则：
式中：A为滴定样品用去的盐酸平均毫升数；
B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；
C为称量样品的克数：（实际上，此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；
14为氮的原子量；（）。
五、实验结果
序号
称量样品(g）
滴定样品用去的盐酸（ml）
滴定空白用去的盐酸（ml）
1
1


2
1

若测定的样品含氮量部分只是蛋白质，则：
式中：A为滴定样品用去的盐酸平均毫升数；
B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；
C为称量样品的克数：（实际上，此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；
14为氮的原子量；（）。
六、注意事项
-，样品中含氮量过高时，则应减少取样量或将样液稀释。
。放置液体样品时，需将吸管插至烧瓶底部再放样：如固体样品，可将样品卷在纸内，平插入烧瓶底部，然后再将烧瓶直起，纸卷内的样品即完全放在烧瓶底部。
，先将蒸馏出口离开液面，继续蒸馏1min，将附着
在尖端的吸收液完全洗入吸收瓶内，再将吸收瓶移开，最后移开酒精灯，绝不能先灭灯，否则吸收液将发生倒吸。
°C，否则氨吸收减弱，造成损失，可置于冷水浴中。
混合指示剂在碱性溶液中呈兰绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色。
七、思考题
:蛋白质的消化、氨的蒸馏、氨的滴定。
答：
蛋白质的消化:

氨的蒸馏：



氨的滴定：


答：①在消化过程中，消化时间，催化剂，浓硫酸都要一样，一定要消化完全。在消化过程中蛋白质附着在凯氏烧瓶壁上没有被消化
也会影响最终的浓度。
②蒸馏过程中，蒸馏出来的液体量一定要相同，因为不一样的蒸馏水，最后结果不一样，在蒸馏的过程中一开始要加入买的蒸馏水，蒸馏过程中加入的是自己用自来水蒸馏的。蒸馏中出气孔的管子一定要插入硼酸液面以下，蒸馏过程中保证冷凝水一直在流动。蒸馏过程中定氮仪各连接处应使玻璃对玻璃外套橡皮管绝对不能漏气。加入消化液后加氢氧化钠应小心缓慢加入，开关甲不能常开，加完后加水液封。
③滴定过程中应一滴一滴加入，滴定速度过快容易滴定过量。滴定过程中仰视刻度结果偏小，俯视刻度线结果偏大。
④蒸馏装置的洗涤过程中洗涤不干净也会导致误差的出现。
⑤-，含量过大应该减少取样量或者样液稀释。否则会产生误差。
？如何判断消化终点？
答：可能会产生一氧化氮、二氧化氮、二氧化硫。
消化终点判定：在消化开始时，应控制火力，不要使液体冲到瓶颈。待瓶内水汽蒸完，硫酸开始分解并放出白烟后，适当加强火力，继续消化，直至消化液呈透明绿色为止。
八、讨论
经过本次利用微量凯氏定氮法进行面粉中蛋白质的粗测定实验，
使我较为熟练的掌握了凯氏定氮蒸馏装置的使用，并且了解了其工作原理，这对于以后的学****是有很大帮助的。经查阅资料得，面粉中蛋白质的含量大概在9％左右，％，总体来讲，本次试验较为失败，没能够粗略地测量出了面粉中蛋白质的含量。经过分析后，得出几点影响实验结果的因素，如下：
，消化时间，催化剂，浓硫酸都要一样，一定要消化完全。在消化过程中蛋白质附着在凯氏烧瓶壁上没有被消化也会影响最终的浓度；
，蒸馏出来的液体量一定要相同，因为不一样的蒸馏水，最后结果不一样，在蒸馏的过程中一开始要加入买的蒸馏水，