文档介绍：公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]
液相色谱实验报告
华南师范大学实验报告
液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯
一、实验目的
1、掌握高效液相色谱定性和定量分析的原公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]
液相色谱实验报告
华南师范大学实验报告
液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯
一、实验目的
1、掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法； 2、了解高效液相色谱的构造、原理及操作技术。
二、实验原理
高效液相色谱由储液器，泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪。
三、主要仪器和试剂
主要仪器：岛津液相色谱仪(LC-10AT)[配有紫外检测器，Phenomenex ODS 柱]； 10μL微量注射器
试剂：苯标准溶液：μL/mL ；甲苯标准溶液：μL/mL；
苯、甲苯混合标准溶液：μL/mL ；甲醇：80% ；苯和甲苯混合待测溶液；
四、实验步骤
1、标准溶液的配制系列
用100μL的微量注射器分别量取10μL、20μL、 50μL 、100μL的苯和甲苯的混合标准溶液（μL/mL），再分别加入90μL、80μL、50μL 、0μL甲醇将其稀释，作为待测液，其浓度分别为1μL/mL 、2μL/mL 、5μL/mL 、10μL/mL
2、色谱条件优化
①按操作规程开机，并调好色谱条件，使仪器处于工作状态。控制流动相流速为甲醇：min、水： mL/min；柱温30℃；检测波长254nm；观察记录保留时间，通过软件分析两峰分离效果。
②改变色谱条件，控制流动相流速为甲醇：min、水： mL/min；柱温30℃；检测波长254nm；观察记录保留时间，通过软件分析两峰分离效果。
③通过观察两种色谱条件下的峰分离效果，选择最佳的色谱条件。若还不能达到最佳的分离效果，可以再设定不同的色谱条件，然后根据峰分离效果，选择最佳的色谱条件。
3、苯、甲苯定性分析
在最佳条件下，待基线走稳后，用10μL微量注射器分别进样5μL苯和甲苯混合待测溶液，5μL苯标准溶液（μL/mL）和5μL甲苯标准溶液（μL/mL）(微量注射器用甲醇润洗3～5遍)，观察并记录色谱图上显示的保留时间，确定苯和甲苯的峰。