文档介绍：基因检测操作流程
MTHFR C677T , MTHFR A1298G MTRR A66G
实验流程
样本采集信息录入
基因组DNA提取PCR扩增
结果报告结果判读
-I重复清洗一次。
.从磁性分离器上取出离心管，加入400屋清洗液BW-II ,涡旋混匀，磁性分离至上清澄清（期
间上下颠倒数次，以清洗离心管管壁），弃上清（尽可能弃去所有的清洗液BW-II ）。
. 打开离心管盖，将其室温晾干5 min 。
.从磁性分离器上取下离心管，向管中加入 100屋洗脱液ES,涡旋混匀，56c水浴5 min。
. 将离心管置于磁性分离器上，磁性分离至上清澄清。将上清液（分离纯化得到的 DNA 溶液）转移到 2 ml 离心管中，直接用于下游实验或于 -20 ℃保存备用。
： PCR 扩增液准备
（1）每人份需做两个反应，取两个无菌 PCR薄壁管，在PCR薄壁管管盖上依次标有 M、WT。
（2）将试剂从-20C取出平衡至室温，瞬时离心。在标有 M的管中加入29川扩增液（M）,在标有WT的管中加入29 l扩增液（WT）。
（3）分别向以上M和WT各管中加入1川反应液。将管盖盖紧后，涡旋混匀，瞬时离心待用。
C ：待检测 DNA 样本的配制
在上述标有M、WT管中分别加入3 M待测基因组DNA,分别再加入17川ddH2O使终体积为50U。将管盖盖紧后，涡旋混匀，瞬时离心。
D: PCR扩增
将 PCR管放入 PCR仪中，按如下程序扩增：50c 2min； 95c 5min； 94c 30seG 60c 30seG 65c 1min （26Cycles）; 65c 10min； 4c Hold。取出 PCR产物，2~8c 保存。
E ：检测卡检测实验
从密封袋中取出检测卡，将待测样本M与WT管中的PCR产物分别滴加在检测卡对应的样品垫
处，待 2~5 min 对结果进行判读， 20min 后结果不可靠。
F ：质量控制
（1）检测结果中阳性对照应在阳性对照卡检测线（T线）出条带，阴性对照应在阴性对照卡检测线（T线）不出条带。正常检测时，应定期进行阳性对照品及阴性对照品实验。
（2）阳性对照品实验：取两个无菌PCR薄壁管，在PCR薄壁管管盖上依次标有 M、WT,将20M M阳性对照液、20 d WT阳性对照液分别加入标有 M、WT的PCR薄壁管中，再依次分别加入 M 扩增液29M及1 M反应液、WT扩增液29M及1 M反应液，按照步骤中D~F完成，检测线（T线）及质控线（C线）均应出现条带。
（3）阴性对照品实验：取两个无菌 PCR薄壁管，在PCR薄壁管管盖上依次标有 M、WT,将M 扩增液29M、1 M反应液及WT扩增液2941 M反应液分别加入标有 M、WT的PCR薄壁管中，再分别加入20 M阴性对照液，按照步骤中D~F完成，质控线（C线）应出现条带，检测线（T线）应无条带出现。
G:结果判读（如下图、下表）
如上图一所示，以阳性对照液为模板进行 PCR反应，对PCR产物进行检测，检测线（T线）有条带出现，作为阳性对照；以阴性对照液为模板进行 PCR反应，对PCR产物进行检测，检测线（T 线）无条带出现，为阴性对照。若阴性样本有