文档介绍：成绩: 日期: 2015 年 11月1日南京林业大学实验报告专业学号姓名日期实验二、: 核糖核酸酶包括脱氧核糖核酸酶(DNase) 和核糖核酸酶( RNase) 是水解 DNA 和 RNA 磷酸二酯键的核酸内切酶,与植物的生长、分化、衰老、种子成熟和萌发等生理生化过程密切相关。通过测定这两个酶的活性,可间接获得植物体内核酸含量极代谢情况。推测其所处的生长发育状态和阶段。二、原理以植物叶片试验材料,提取粗酶液,进行酶促反应,以反应混合物中酶液在 30min 内催化形成具有 OD 值为 1 的硝酸镧可溶性 RNA 碎片的酶量为 1个酶活性单位。三、材料、试剂与仪器设备: 植物材料: 绣球实验试剂: 的 HAc (醋酸缓冲液 ); 巯基乙醇; 1ml 酵母 RNA ; 冷的硝酸镧-HCl 溶液。实验器具: 分光光度计;离心机;研钵;离心管;移液管;试管等;恒温水浴箱。四、实验步骤绣球叶片剪碎用的 HAc (醋酸缓冲液 )分三次加入( 1, 1, 1),研磨提取,在 5000rpm 下离心 10min, 取上清液。酶液放入离心管中+ 巯基乙醇+1ml 酵母 RNA+ HAc ( )混合均匀,在 37水浴保温 30min. -HCl 到时间后,将离心管放入冰浴中放置 3~4min , 加入冷的硝酸镧-HCl 溶液→强烈震荡混合液→至于冷冻离心机中离心 15min (5000rpm/min), 测定上清液的体积。 + 蒸馏水定容至 3ml 。在 260nm 下(紫外分光光度计)测定 OD 值。活力单位=所测 OD260nm × 10 五、结果计算 OD=-= 活力单位=*10= 六、注意事项 1. 研磨叶片要充分,在离心前要选择合适的离心管一起离心。 2. 加入其他溶剂时要注意精确,不然会导致实验有失误。