文档介绍：: .
1 .目的
掌握凯氏定氮法测蛋白质的原理、操作、条件、注意事项。
2 .原理
蛋白质是含: .
1 .目的
掌握凯氏定氮法测蛋白质的原理、操作、条件、注意事项。
2 .原理
蛋白质是含氮有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解。分解的氨与硫酸结合生成硫酸钱。然后碱化蒸储使氨游离，用硼酸吸收后在以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量计算含氮量再乘以换算系数，即
为蛋白质含量。
3 .试齐I」
浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾，所有试剂均用不含氮的蒸储水配制
混合指示液
1份（1g/L）***红乙醇溶液与5份1g/L澳甲酚***乙醇溶液临用时混合。也可用2份***红乙醇溶液与1份1g/L次***蓝乙醇溶液临用时混合。
氢氧化钠溶液（400g/L）
标准滴定溶液
硫酸标准溶液［c（1/2H2SO4）=］或盐酸标准溶液［c（HCl）］
硼酸溶液（20g/L）
4 .仪器
定氮蒸储装置
5 .样品
全蛋（）
6 .操作
样品处理
准确称取2—5g半固体样品，小心移入干燥洁净的500mL凯氏烧瓶中，,硫酸钾10g和浓硫酸20mL,轻轻摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜放于加有石棉网的电炉上，小火加热，待内容物全部炭化后，泡沫完全消失后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色呈请透明后，,取下放冷，慢慢加入20mL水。放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
连接装置
装好定氮装置，于水蒸气发生器内装水至2/3处，加***红指示剂数滴
及少量硫酸，以保持水呈酸性，加入数滴玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，
加热至水沸腾。
蒸储、吸收及滴定
向接收瓶（锥形瓶）内加入10mL20g/L硼酸溶液及混合指示剂1-2滴，并使冷凝管的下端插入液面下。，在将10mL400g/L氢氧化钠溶液倒入碱液管中，提起玻璃塞使其缓缓流入反应室，并加水于小漏斗中以防止漏气。开始蒸储。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸储5min,移动接收瓶，是冷
凝管下端离开液面，再蒸储1min,然后用少量的水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，，记录盐酸溶液用量。
，记录空白试验消耗盐酸标准溶液的体积。
7 .数据记录
原始数据
可疑值弃留
实验获得的数据均合理，无可疑值。
整理数据
精?/mL
粗?/mL
平行t^验1平行试验2平行t^验3空