文档介绍:HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量
摘 要:用HPLC法测定了黄芪甲昔含量•样品从东北黄芪中提取,用色谱纯甲醇溶解并稀释,采用YWG-C
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柱,流动相为甲醇,在205 nm下检测, AUFS, mg,用甲醇溶解并定容于10 mL容量瓶中,精密吸取20 uL进样,连续5 次,测定峰面积,%.
回收率试验
取5 g已测定黄芪甲苷含量的生药提取水煎液平均分成10份,取5份, mg/mL的黄
mL,按“样品测定”项下方法操作,结果见表2.
The results of recovery
The content of astragaloside in sample/mg
The adding weight of astragaloside/mg
Measuremental
weight/mg
Recovery/%
5
5
5
5
5
x=%,RSD=%
稳定性实验
样品溶液在室温下放置,每隔3h测定1次,12h内共测5次,、、、 mg/g,
%,证明黄芪甲苷含量至少12h内稳定.
样品测定
将黄芪水提取液50mL(相当于含生药50g)加热浓缩至30mL,加大量甲醇至上清液再加甲醇无浑浊,醇沉多 糖,抽滤,滤液用真空旋转薄膜蒸发器回收甲醇至干,残渣加少量H0制成水溶液,用100mL乙醚振摇萃
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取脱脂3次,取水层加水饱和正丁醇的上层液萃取数次,合并正丁醇液,减压旋转蒸发正丁醇至干,残渣 加少量95%乙醇溶解,然后均匀滩洒在装有干燥Al O : Mg0(36 g:9g)混合物的G漏斗中,并用75%洗脱3h,
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洗脱液回收乙醇后得残渣用95%乙醇溶解,得乙醇液加大量乙醚,抽滤,弃去滤液,滤渣附于滤纸上使其 自然挥干乙醚,将滤纸浸于甲醇中使滤渣充分溶解,弃去滤纸,定容至50mL,备用,精密吸取1mL置50mL 容量瓶中,用色谱纯甲醇定容至刻度,振摇,过微孔滤膜,进样
20uL,按上述色谱条件测定,并由回收 方程计算含量,得图谱(图2、3),结果如表3.
The chromatogram of the sample
The chromatogram of control
The measuremental results of the sample content
n
1
2
3
4
5
Mean
A(X106)
579
208
172
491
960
682
n=5, RSD=%,Ai=0. 511 68 2X 106, Ci= -i
则50 g药中黄芪