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文档介绍

文档介绍:医学微生物学实验
医学微生物学实验课是一门操作技能很强的课程。
实验课教学的主要目标是使学生了解医学微生物学主要的研究方法和手段,掌握基本技能和基本原理,树立牢固的无菌观念。
更重要的是培养学生自学能力、科学思维能力、动手能力和表达能力。养琼脂

90
3
5
18支,中试管,斜面
5~7
营养肉汤

55
1
3
18支,小试管,液体
8~10
半固体

55
3
3
18支,小试管,高层
※公共培基,勿作标记!
培养基的制备
组号
培养基
称量
(g)
水量
(ml)
煮沸
(次)
分装
(ml)
备注(40人份)
1
营养琼脂

300
4瓶,500ml瓶,平板
2~4
营养琼脂

70
3
5
14支,中试管,斜面
5~7
营养肉汤

50
1
3
14支,小试管,液体
8~10
半固体

50
3
3
14支,小试管,高层
※公共培基,勿作标记!
培养基的制备
组号
培养基
称量
(g)
水量
(ml)
煮沸
(次)
分装
(ml)
备注(50人份)
1
营养琼脂

300
4瓶,500ml瓶,平板
2~4
营养琼脂

90
3
5
18支,中试管,斜面
5~7
营养肉汤

55
1
3
18支,小试管,液体
8~10
半固体

55
3
3
18支,小试管,高层
※公共培基,勿作标记!
培养基的制备
组号
培养基
称量
(g)
水量
(ml)
煮沸
(次)
分装
(ml)
备注(生物技术)
1~3
营养琼脂

60
3
5
12支,中试管,斜面
4~5
营养肉汤

50
1
3
16支,小试管,液体
6~8
半固体

40
3
3
12支,小试管,高层
※公共培基,勿作标记!
1500W电炉●安全警告
培养基沸腾溢出→流入电炉:
①触电→危及生命!
②短路→断电,③…。
边台柜子内器材:
架盘药物天平、砝码,细菌干粉培养基,锥形瓶,量筒,试管筐,灭菌平皿(第一组)。
锥形瓶用后洗净、包装。
器材放回原处,依次摆整齐。
边台抽屉内器材:
试管(棉塞),刻度吸管,洗耳球,称量纸,药勺,硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋,尺子。
药勺、吸管用后洗净,放回原处。
称量纸置于左盘,游码移至标尺左端“0”点位置上,指针应对准中线,取得平衡。否则将杠杆两端的调整螺母旋动调节平衡。
秤物时“左物右码”,物品在左盘上,砝码在右盘,尽可能放在秤盘中心。天平保持干燥、清洁。
培养基
培养基是用人工的方法,将多种营养物质,根据各种微生物生长繁殖的需要而合成的一种营养制品。它的主要成分是蛋白胨、牛肉膏、***化钠和水,~。
培养基制备的一般程序:
①调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。 ②干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定 →保存。
培养基的制备原则:
(1)适当的营养成分,(2)合适的酸碱度,(3)配制后必须灭菌。
培养基的种类(按物理性状分类)
液体培养基:不含凝固剂(琼脂),用于增菌,纯培养。
固体培养基:含1%~2%琼脂,用于分离培养,纯培养。
半固体培基:%~%琼脂,用于动力检测,保种。
液体培养基 固体斜面培养基 半固体培养基
培养基的种类(按用途分类)
基础培养基:含一般细菌生长繁殖所需的基本营养成分,可作为一些特殊培养基的基础成分。如普通平板。
营养培养基:在基础培养基中加入血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和须要特殊生长因子的细菌生长。如血平板。
增菌培养基:促进目的菌的生长,适用于含菌量较少的标本,如葡萄糖肉汤。
选择培养基:在培养基中加入抑制剂抑制杂菌生长,有助于目的菌的生长,如EMB、SS平板。
鉴别培养基:利用细菌分解能力及代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,用来试验细菌的生化反应、代谢产物,如糖发酵管。
厌氧培养基:用于培养厌氧菌。
培养基的灭菌
基础培养基:121℃高压蒸汽灭菌15~30分钟。
含糖培养基:115℃灭菌15分钟。
鸡蛋、牛奶培养基:75~100℃间歇灭菌3次(1天1次)。
不耐高温的液体成分:滤菌器滤过除菌(EK型蔡氏滤器、 G5或G6玻璃滤器、)
固体培养基的