文档介绍：第三章 培养基
教学目标:
、配制及高压灭菌（重点）
培养基
种 类
成 分
生一种天然复合物。一般使用浓度在10～20%，它在愈伤组织和细胞培养中有促进作用。
椰乳(CM)
香蕉泥
；
-200ml/L；
。
香蕉泥
马铃薯：去皮和芽后使用，用量为150g/L-200g/L，煮30min，再经过滤，
即可加入培养基。马铃薯汁也具有较大的pH缓冲作用，用添加马铃薯的培
养基可得到健壮的植株。
酵母提取液(YE)(～%)，主要成分氨基酸和维生素类。
麦芽提取液(～%)；
苹果汁、番茄汁、柑橘汁，黄瓜的果实，未熟玉米的胚乳等。
以上这些天然复合物的特性是:
遇热较稳定，大多在培养困难时使用，有时有效。
其它天然复合物
主要有甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、水解酪蛋白(CH)、水解
乳蛋白(LH)等，是重要的有机氮源。
甘氨酸：能促进离体根的生长，对组织培养的生长也有良好的促进作
用，通常用量为2-3mg/L；
丝氨酸、谷氨酰胺：有利于花药胚状体或不定芽的分化；
水解酪蛋白(CH)和水解乳蛋白(LH)：是多种氨基酸的混合物，对胚状
体或不定芽的分化有良好的促进作用，通常用量是300-2000mg/L。
氨基酸(amino acid)
碳水化合物
种类：蔗糖或葡萄糖、果糖等。
蔗糖浓度：2-3%，胚培养为4-15%。
作用：除提供碳骨架和能源，调节渗透压。
注意：
。
。
维生素以辅酶形式参与生物催化剂-酶系的活动，参与细胞的蛋白质、脂肪、糖代谢等重要生命活动。
种类：VB1、VB6、Vc及生物素、叶酸、泛酸及泛酸钙等。
浓度：－
作用：VB1 促愈伤组织产生，提高活力
VB6 促根生长
Vc 防止组织褐变
烟酸 对植物的代谢过程和胚的发育都有一定作用。
维生素
植物激素
主要包括：
细胞分裂素(KT、ZT、6-BA、zip)；
生长素(2,4-D、IAA、IBA、NAA)；
赤霉素(GA3)等。
培养体支持材料
：
用量 6－10g/L；
种类 琼脂粉、琼脂条；琼脂糖。
作用 固化作用；无营养。
注意：琼脂使用有优缺点；新买应
试凝固力。
2. 其它：
玻璃纤维，滤纸桥，海绵等。
辅助性物质
抗生素
抗氧化物
活性炭
植物组织培养中材料的预先培养消毒只能进行表面灭菌，而对材料组织内部所带的细菌和霉菌的危害，则可在培养基中添加抗生物质。这对大量通气长期培养，也同样有效。
常用的抗生素有：青霉素、链霉素、庆大霉素等；
用量：5－20%；
注意：抗生素对组织生长有抑制作用，使用要慎重。
抗生素
链霉素
青霉素
庆大霉素
抗氧化物
：半胱氨酸、VC、PVP；
：50－200mg/L；
：防止氧化；抑制褐化，适用于热带木本及少数草本植物。
：可用抗氧化剂洗涤外植体伤口表面。
人参等中药
在组织培养中中药有其应用价值：
实验表明表现出明显的促进作用，尤其是和适量的激素配合时，
效果更好。使用的多种中药中又以人参效果更好。
活性炭
：具吸附作用；防止酚类物质污染而引起组织褐化死亡。茎尖初代培养可防褐化；促进新梢增殖（ －%）；促进生根；防止组培苗玻璃化（%）；有利于胚胎培养。
：－10g/L
：活性炭具副作用。
母液的配制和保存
培养基的配制
pH值的调整
培养基的分装和灭菌
母液的配制和保存
经常需在配制培养基时，为减少工作量，减少称量的误差，一般配
成比所需浓度高10～100倍的母液，用时可按比例稀释。
配好的母液需要贮存于2-4℃的冰箱中，定期检查有无沉淀和微生物
污染，如果出现沉淀或微生物污染，则