文档介绍：实验 1: 大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌( ) 分布:人和哺乳动物肠道,此外还广泛分布于水、污水、土壤、谷类、乳制品等当中。大肠杆菌在人体的_____ 中一般对人体无害,但任何大肠杆菌如果进入__________ 都会对人体产生危害。大肠杆菌是_______ 工程中被广泛采用的工具。肠道泌尿系统基因革兰氏______ (填阴或阳)性菌阴代谢类型: 异养,兼性厌氧型生长适宜温度: 质粒、 EcoR Ⅰ限制酶、 -DNA 连接酶、受体细胞 37 ℃左右易培养、生活周期短等特点。细菌的代谢类型?自养型细菌?异养型细菌: 光合自养型:化能自养型:大部分腐生菌和寄生菌如蓝细菌如硝化细菌 1、同化作用类型 2、异化作用类型需氧型细菌厌氧型细菌兼性厌氧型细菌大多数细菌如破伤风杆菌如酵母菌、大肠杆菌。大肠杆菌属于异养、兼性厌氧型细菌大肠杆菌酵母菌放线菌霉菌菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量生长繁殖时,所形成的肉眼可见的具有一定形态结构的子细胞群体。不同微生物形成的菌落具有不同的特征, 是鉴定菌种的重要依据。如菌落的大小、形状、边缘、光泽度、颜色、透明度等。菌落的概念白色或乳白色,光滑大肠杆菌菌落: 二、培养基不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 3、调节 pH 1、培养基的种类 2、成分水、碳源、氮源、无机盐、生长因子(生长因子即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶) 真菌: 5~6 细菌: ~ 4、有时会加一定量的***化钠以维持一定的渗透压(固体、半固体、液体) ,所有防止________ 污染的方法。三、无菌操作_________ 必须无菌、_________ 也必须要无菌、___________ 时不能带入其他杂菌主要包括: 杂菌 : 使用较温和理化因素,仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的微生物的过程。不能杀死芽孢和孢子。灭菌: 使用强烈的理化因素消灭物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子。各种器具培养基转移菌种高压蒸汽灭菌洒精灯灼烧灭菌干热灭菌灭菌方法: 煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒法(酒精、***气等) 紫外线消毒法消毒方法: 3、常用的灭菌和消毒的方法培养基、无菌水、各种耐高温的玻璃金属器具需要保持干燥耐高温的玻璃金属器皿接种环等金属器具高压蒸汽灭菌锅 1kg/cm 2、 121 ℃下维持 15min. 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1)培养细菌用的培养基与培养皿(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手答:( 1)、( 2)需要灭菌;( 3)需要消毒。(一)制备 LB培养基(通用的细菌培养基) 1、配方:蛋白胨 克,酵母提取物 克, ***化钠 克,水 50ml (配固体培养基再加琼脂 1克) 溶解计算称量调 pH 分装加塞,包扎 2、流程四、操作步骤灭菌倒平板①分装: 注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,因此在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用__________ 。②加塞:试管用塑料盖或________ ;三角瓶口用_______ 或_________ 封口,再用_________ 或报纸封口。③包扎: 用________ 或报纸三角漏斗棉花塞封口膜 6层纱布牛皮纸牛皮纸高压蒸气灭菌法④灭菌 1)加水: 2)装锅: 向外层锅内加入适量的水,加水的要求是_________. 物品放置的要求______________________ : 加盖:将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的_______ 内。再以________ 方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。不触及内胆整齐、稳定、留出空隙排气槽两两对称