文档介绍:考试题型:填空题,选择题,名词解释(4题),问答题(3题)
《免疫学实验》复****题
1、多克隆抗体:用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫物,可刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物与一定量的SRBC结合,在37°C条件下免疫活性淋巴细胞释放出溶血素,在补体的参与下,可溶解周围的绵羊红细胞,从而在每个抗体形成细胞周围形成一个肉眼可见的溶血空斑。
12、免疫组织化学技术:是指在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,借助可见的标记物,对抗原抗体进行定位、定性和定量检测的一种免疫检测方法。
13、酶免疫组织化学技术:直接以细胞或组织切片为抗原相,以酶联免疫技术检测抗原或抗体的存在与否或定位的一类酶免疫技术。
问答题
1、弗氏佐剂中弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂有何区别?
弗氏佐剂根据其成分为弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂:不完全弗氏佐剂:由羊毛脂1份、液体石蜡5份组成。
完全弗氏佐剂:每毫升弗氏不完全佐剂中加入1—20mg卡介苗即为弗氏完全佐剂。
2、如何制备可溶性抗原多克隆抗体?如何分离抗血清?如何进行鉴定及效价测定?
一:Q免疫原的制备@免疫动物Q免疫血清的收集Q免疫血清的鉴定Q免
疫血清的保存
二:分离抗血清:取好血后,放入37°C,30min,使血清充分析出,经3000rpm/5min分离血清,剩余放入一20C冰箱保存。
三:用混合抗原或抗体鉴定抗体或抗原,出现一条沉淀线说明待测抗原或抗体纯,出现多条说明不纯。
效价测定:通过双向免疫扩散进行效价测定,中心孔加免疫用抗原,外周孔分别加入对倍稀释过的血清,以出现沉淀线的最高稀释倍数为该抗体的效价。
3、凝集试验有哪些?可用于检测的原理是什么?
根据凝集反应中抗原的性质,反应的方式分为:①直接凝集反应②间接凝集反应直接凝集试验:玻片凝集试验:ABO血型鉴定;
试管凝集试验:外斐试验、肥达试验。
间接凝集试验:正向间接凝集试验、反向间接凝集试验、间接凝集抑制试验、协同凝集试验、间接血凝试验、胶乳凝集试验、明胶凝集试验。
检测原理:颗粒性抗原,如细菌、红细胞、螺旋体、细胞性抗原、可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,与相应的抗体(或抗原)在适量的电解质存在的条件下,经一定时间后凝集成肉眼可见的凝集现象。
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4、为什么对流免疫电泳试验的敏感性要比双向免疫扩散高8-10倍?
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对流免疫电泳是把扩散和电泳技术结合在一起的方法。多数蛋白质抗原物质在碱性环境中由于羧基电离而带负电荷,在电泳时从负极向正极移动。抗体属球蛋白,所暴露的极性基团较少,在缓冲液中解离也少,在琼脂电渗作用下由正极向负极移动,这样就使抗原和抗体定向移动,发生反应,并在短时间内出现肉眼可见的白色沉淀线,同时,由于抗原抗体在电场中的定向移动,限制了抗原抗体分子的自由扩散,因而提高了试验的敏感度(比双向免疫扩散高8—10倍)
5、什么是免疫标记技术,它有何特点?
免疫标记技术是将已知抗体或抗原标记上易显示的物质,通过检测标记物来反应抗原抗体反应的情况,从而间接地测出被检抗原或抗体的存在与否或量的多少。常用的标记物