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文档介绍:南方医科大学微生物实验报告
2016年南方医科大学医学微生物学实验报告
日期 2016年5月22号
脓汁和粪便标本中病原菌的检测 题目 成绩
参与者名字:马浩楠 丁作者:马浩楠 实验者 超 王尧鑫 桂文茁
31400200—7尺洗—稀释品红—复染1分钟—水洗—吸干,
镜检。
油镜使用方法:10X物镜—看清标本—滴加香柏油—100X油镜—浸泡油 中?模糊物象?细调节调焦,观察物像?记录结果?关闭电源?擦镜纸拭去香柏油 —擦镜纸沾少许乙醇和***(7:3)混合液擦拭?擦镜纸擦拭油镜。 5、液体培养基接种(肉汤接种)
甲?金黄色,乙?白色,
丙?紫黑,丁?粉红。
方法:(1)接种环斜面取菌,在靠近液面的管壁上,上下研磨接种;(2)在管壁上, 将接种环内的菌膜拍破。退出接种环,烧灼灭菌;(3)标记:组号,颜色 6、细菌的生化试验等
(1)细菌的糖发酵实验:
?在紫黑色的斜面培养基取适量菌落接种在含有葡萄糖的发酵管中,并做好标记
?在紫黑色的斜面培养基取适量菌落接种在含有乳糖的发酵管中,并做好标记
?在粉红色的斜面培养基取适量菌落接种在含有葡萄糖的发酵管中,并做好标记
?在粉红色的斜面培养基取适量菌落接种在含有乳糖的发酵管中,并做好标记
步骤:?用砂轮在糖发酵管液面上方2,3cm处,切割一道切痕。?两手握住发酵管将管子折断。管口烧灼灭菌。?接种针斜面取菌,伸入培养基内,在管壁上,上下研磨接种。退出接种针,烧灼灭菌。?管口朝向相同,放置在平皿内。 (2)抗菌素敏感性试验
纸片扩散法
甲?黄色菌液 乙?白色菌液
丙?紫黑菌液 丁?粉红菌液
方法:?先取?环菌液;?沿平板直径拉一条细菌接种线;?再取一环菌液;?旋转 平板90度角,拉另一条接种线,使两条细菌接种线呈“十字形”;?然后在平板上半部,作 连续来回密集划线,每次划二分之一平板;?旋转平板90度角,二次密集划线;?旋转平 板90度角,三次密集划线;?旋转平板90度角,四次密集划线;?设三点,呈等边三角距离; ?点距离平板边缘约15mm;?作标记:青、先、庆;?镊子尖嘴朝下,夹取相应药物纸片的边缘,平贴在已设定的位置上,轻轻按压纸片。
(3)血浆凝固酶试验
步骤:?取二滴兔血浆置于洁净的玻片上。?分别用接种环取白色和金黄色菌苔(约2,3个菌落的菌量)与血浆研磨混合成直径8,10mm的一层薄菌膜。?立即观察结果。
(4)半固体穿刺接种法
?用接种针取紫黑色菌落垂直刺入半固体培养基,再按原路返回,并做好标记
?用接种针取粉红色菌落垂直刺入半固体培养基,再按原路返回,并做好标记
步骤:?接种针斜面取菌,从半固体中心,垂直刺入,到达培养基底部5分之4处,再循原来的路线,退出接种针。?管口、接种针经火焰烧灼灭菌?37?下培养18~24小时。
7、细菌的血清学试验、结果分析
玻片凝集试验
?取洁净的载玻片一张,将磨面近端设为对照区,滴加生理盐水15ul。远端设为试验区,滴加福氏志贺菌诊断血清15ul,
?用接种环分别取粉红色菌苔,约2个小菌落的菌量,研磨于盐水或血清内,混合均匀。
?载玻片来回倾侧,让菌液充分混匀,凝集速度更快、结果更清楚。
?观察记录结果:菌液凝集者记为阳性,菌液均匀混浊记为阴性。
四、结果与讨论
(一)实验结果

图片分析:洗手图不是很理想,上面同学的洗手后与消毒后与预期的不一致,可能是操作不当引起的。
:
(1 )脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落,菌落的色素是脂溶性的,是细菌本身的颜色。菌落直径2mm左右、圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明。
(2 )粪便标本在伊红美蓝平板上,有紫黑色、淡粉红色两种菌落,菌落色素是水溶性的,不是细菌本身的颜色,紫黑色菌落具有金属光泽、大而隆起、不透明的菌落,菌落直径2?3mm;粉红色菌落淡粉红色,半透明,直径1?2mm.
图片分析:由于同学都是第一次划线,所以划线都不是很好。
:
在斜面培养基上得到四种菌体的纯培养标本,从普通平板上挑取的黄色 或白色菌落接种的斜面,菌苔的颜色,还是原来菌落的颜色,黄色或白色。 从伊红美蓝平板上挑取的紫黑色或粉红色菌落接种的斜面,菌苔已经没有原来菌
落的颜色。菌苔灰白色、表面湿润、光滑、前者不透明,后者透明。
图片分析:中间两组效果不好,可能来自于采菌过少或者划线操作不当
:
脓汁标本(左边为白色菌苔,右图为金黄色菌苔)
粪便标本(左图为粉红菌苔,右图为紫黑色菌苔) 镜下观察:
用普通平板,从浓汁标本中分离得到黄色、白色两