文档介绍：血清乙型肝炎病毒e抗原检测作业指导书(ELISA)
原理
在微孔条上预包被被纯化乙肝e抗体(HBeAb),配 以酶标记抗原(HBeAb-HRP)及TMB等其它试剂，采用 夹心法原理检测人血清(或血浆)中乙肝e抗原 (HBeAg)o
标血清乙型肝炎病毒e抗原检测作业指导书(ELISA)
原理
在微孔条上预包被被纯化乙肝e抗体(HBeAb),配 以酶标记抗原(HBeAb-HRP)及TMB等其它试剂，采用 夹心法原理检测人血清(或血浆)中乙肝e抗原 (HBeAg)o
标本采集
1米集前病人准备：受检者应空腹
2. 2标本种类：血清或血浆
3标本要求：采集病人静脉血3ml(可用EDTA抗凝), 室温放置不超过4小时，分离血清备用。
标本储存：2-8°C保存不应超过1周，-2(TC不应 超过3个月，-70°C长期保存，应避免反复冻融。
标本运输：密封，室温运输。
标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或 脂血标本不宜作此项检测。
1试剂名称：乙型肝炎病毒e抗原诊断试剂盒
：英科新创（厦门）科技有限公司。
3 包装规格：96Test/Kit
4试剂盒组成：
HBeAg微孔板，HBeAg酶标记抗原，HBeAg阳性对 照血清，HBeAg阴性对照血清，浓缩洗涤液，底物A, 底物B,终止液，封口膜，自封袋。
5试剂储存条件及有效期：2-8°C避光保存，有效期 9个月。
仪器设备
1仪器名称：自动酶标仪
2仪器厂家：KHB
3仪器型号：ST360
操作步骤
1平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温
（18-25°C）,微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。
2配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应 充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馅水或去离子水按1： 19 稀释后使用。
3编号：将微孔条固定于支架，按序编号。
：分别用加样器在对照孔中加入阴、阳性对 照血清各50|il于相应孔中。
8. 5加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50",轻拍 混匀。
8. 6温育：置37°C温育60分钟，室温平衡5分钟。
8. 7洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每 次应保持30-60秒的浸泡时间）。
8. 8显色：每孔加入底物A、B各50|il,轻拍混匀， 置37°C暗处15分钟。
8. 9终止：每孔加终止液50|il,混匀。
8. 10测定：用酶标仪单波长450nm或双波长 450/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白 对照一孔，30分钟内完成测定，并记 录结果）。
结果判断与分析
1临界值（.）的计算：临界值二阴性对照孔0D 值NX2. 1,阴性对照0D均值大于0. 1时应重新试验， 小于0. 05时以0. 05计算。
2结果判定：样品OD值S/C. 0> = 1者为HBeAg阳性
样品OD值S/C. 0〈1者为HBeAg阴性
质量控制：
每次试验用含量为2NCU/ml的HBeAg质控血清同 步检测，S/C0值应在控制范围内；如失控，则要检查 试剂效期、储藏温度、试验温度是否正常、操作步骤 是否正确，直至重新试验使其在控。
参考范围：阴性或阳性
临床意义：HBeAg阳性可作为体内HBV处在复制 状态及血清具有传