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上传人:guoxiachuanyue005 2022/6/10 文件大小:261 KB

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微生物实验.docx

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文档介绍

文档介绍:实验一培养基的配制
实验原理:
培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质,用人工方法配制而成的营养基质。其中含有碳源、氮源、无机盐、生长因子以及水分等。微生物在培养基上生长繁殖还必须在最适酸碱度范围内才能表现它们最大生命力,因此不,冷却至50°C左右(以手背能忍受的温度为准)温度过高时,皿盖上的冷凝水太多;温度低于45°C时,培养基易于凝固而无法制作平板。
平板的制作应在酒精灯火焰旁进行,右手掌心握住三角瓶的底部,左手打开三角瓶棉塞,以右手的无名指和末指夹持瓶塞,灼烧瓶口。左手拿培养皿,用左手的大拇子将皿盖掀开一缝,至瓶口刚好伸入,向皿内注入培养基(约15mL,),迅速盖好皿盖。
左手持培养皿稍加旋转摇动,使培养基均匀分布于整个培养皿底部,然后平置于桌面水平位置,待凝后即为平板。
(三)菌种的分离纯化
1、如果要分离纯化的是菌液很浓,先按照下图将菌液稀释。
Originalsample
9mlH2O(10-1dilution)
9mlHQ(1dilution)
9mlH2O(10-3dilution}
9mlHjO(10-4dilution)
Mixwithwarmagarandpour.
/
2、平板
离法(3皿)

将稀释过的菌液分离样品摇匀,用无菌移液管取1ml的菌液移至无菌培养皿中,然后将融化,凉至50弋左右的培养基,在每个培养皿内各倒入约15ml,摇匀,凝固,制成平
:(3皿)
烧去多余的菌种。将接种环再次通过稍打开边缘空白处接触一下使接种环冷却,然后从接线,划线时平板面与接种环面成30-401,以
将菌液分离样品摇匀,以无菌操作用接种环直接取试管中待分离纯化的菌液,将菌液点种在平板边缘一处,取出接皿盖的缝隙(约30°C)伸入平种有菌的部位在平板上自左向右轻手腕力量在平板表面轻巧滑动划线,接种环不要嵌入培养基内划破培养基,线条要平行密
集,充分利用平板表面积,注意勿使前后两条线重叠,划线完毕,,待冷却后放置接种架上。
划线轨迹图
平板涂布分离法:
将菌液分离样品摇匀,。右手拿无菌三角玻扒在平板培养基表面上,将菌悬液先沿一条直线轻轻地来回推动,使之分布均匀,然后改变方向沿另一垂直来回推动,平板内边缘处可改变方向用三角玻扒再涂布几次
5、将分离纯化好的平板30C恒温培养箱培养l-2d,平板倒置培养。
注意事项:
(1)、操作前请将台面用抹布清洁,擦干;双手用洗手液清洁,擦干。再用75%酒精擦手,作表面消毒,待酒精挥发后才能点燃酒精灯。(可通常是点燃酒精灯再用酒精擦手)
(2)、酒精不足的酒精灯请自行添加!注意:添加量不得超过容量的2/3。
(3)、将所有空白平板贴好标签,注明接入菌种的名称,接种班别,接种组别,接种日期。
(4)、传代时,分清菌台和培养基,挑取少量菌种,切勿划破培养基。
(5)、操作时要关闭门窗,风扇,人不要随意走动,端坐,平缓呼吸。
(6)、不同的菌种,不同的接种方式,使用不同的接种工具(针,钩,环,吸管)。
细菌:枯草杆菌,大肠杆菌,单球菌,谷氨酸菌,假单孢杆菌,巨大芽孢杆菌(接种方式:“之”字划线,接种