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文档介绍:***离子胶体金比色检测法及***离子检测试剂盒的制作方法
***离子胶体金比色检测法及***离子检测试剂盒的制作方法
本发明公开了一种***离子胶体金比色检测法及***离子检测试剂盒。本发明主要是利用***离子吸附在柠檬酸离子包裹的金纳米粒子溶液(胶体金),再加氨酸,并且,当将被检测物质及识别分子加入所述胶体金时,若被检测物质含有Hg2+,则所述胶体金的紫外吸收峰将发生红移。
[0017]本发明的另一个方面提供了一种***离子胶体金比色检测法,其包括:提供柠檬酸钠包裹的胶体金,并加入被检测物质以及作为识别分子的赖氨酸,当被检测物质包含Hg2+时则所述胶体金的紫外吸收峰发生红移,从而实现Hg2+的检测。
[0018]进一步的,当将被检测物质及识别分子加入所述胶体金时,若被检测物质含有Hg2+,则所述胶体金的颜色将从红色变成紫色或灰色。
[0019]在本发明的一实施方案之中,可采用柠檬酸钠还原法制备出柠檬酸钠包裹的胶体金。
[0020]在一较为典型的实施方案之中,还可将***金酸煮至爆沸后,在剧烈搅拌条件下快速加入柠檬酸钠,至溶液颜色变成透亮红色,获得柠檬酸钠包裹的胶体金。
[0021]在一较为典型的实施方案之中,还可采用离心法对所述胶体金进行浓缩处理。
[0022]进一步的,还可取一系列含有不同浓度Hg2+的标准样品与赖氨酸分别加入所述胶体金形成一系列不同的混合反应体系,再分别测量各混合反应体系从200 nm到850 nm的紫外光谱图,并根据A7tltZA52tl的比值绘出标准曲线。
[0023]进一步的,在本发明的一实施方案之中,可先将被检测物质或含Hg2+的标准样品加入所述胶体金,使其中的金纳米粒子充分吸附Hg2+,而后再加入赖氨酸,使吸附于金纳米粒子表面的Hg2+与赖氨酸两端的-NH2形成N-Hg-N结构,从而使金纳米粒子聚集。
[0024]在本发明的一更为具体的实施案例中,在该一系列混合反应体系中,Hg2+的终浓度为O? nM, mM。
[0025]本发明利用***离子吸附在柠檬酸离子包裹的金纳米粒子溶液,再加入可以特异性识别***离子的赖氨酸作为桥梁,使金纳米粒子聚集,发生颜色变化来现场快速检测***离子。其中所采用的重要试剂赖氨酸廉价易得,极大地节省了成本,并且金纳米粒子表面无需进行修饰,方便快捷。
[0026]本发明具有快速且灵敏度高,特异性强,稳定性好,成本低廉等优点,易于推广常规应用。
[0027]以下结合附图及若干实施例对本发明的技术方案作进一步的说明。
[0028]实施例1该***离子胶体金比色检测法包括如下步骤:
(I)用柠檬酸钠还原法制备出柠檬酸钠包裹的金纳米粒子溶液;
%的***金酸煮至爆沸后,在剧烈搅拌条件下快速加入1%的柠檬酸钠,待溶液颜色变成透亮红色,继续煮沸5分钟使金纳米粒子溶液稳定。
[0029](2)在步骤⑴制备的金纳米粒子溶液中加入Hg2+,通过静电吸附将Hg2+固定在金纳米粒子表面;
将步骤(I)制备的金纳米粒子溶液通过离心(9400 xG)浓缩至4倍,取7个离心管(编号1,2,3,4,5,6,7,8),每管加入80 μ L 4倍浓缩的金纳米粒子溶液和10 μ L不同浓度的Hg2+溶液,使Hg2+终浓度为0,, , , , ηΜ,反