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血清总蛋白白蛋白测定SerumtotalproteinAlbumintest.ppt

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血清总蛋白白蛋白测定SerumtotalproteinAlbumintest.ppt

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血清总蛋白白蛋白测定SerumtotalproteinAlbumintest
2018. 06. 02
临床生物化学: 是研究机体健康和疾病的生物化学过程。测定体液或组织aOH 、硫酸铜、 酒石酸钾钠、碘化钾) 蛋白标准(60 g/L)
三、操作步骤 加入物(ml) B S×2 U×2 血清 / / 标准液 / / 双缩脲试剂 混匀,37℃,10分钟,540nm处比色,1cm光径比色杯,B管调零
注: 、脂血及高脂血 症血清不用做血清自身对照管。 ,目的是检 验各个试剂的好坏
四、结果 Au 血清总蛋白(g/L) = —— X 60 As 五、正常参考范围 60-80g/L
六、临床意义 1、  总蛋白浓度升高 (1)蛋白质合成增加:大多见于多发性 骨髓瘤患者 (2)血浆浓缩,如急性失水、外伤性休 克、慢性肾上腺皮质功能减退。
2、  总蛋白浓度降低 (1)蛋白质合成障碍:肝功能严重受 损→蛋白质合成减少 (2)蛋白质丢失增加:严重烧伤、大 出血、肾病综合征、溃疡性结肠炎 (3)营养不良或消耗增加:营养失调、 低蛋白饮食;患消耗性疾病 (4)血浆稀释:如静脉注射过多低渗 溶液或各种原因引起的水钠潴留。
七、注意事项 1、 黄疸血清、严重溶血、某些试 剂(如葡萄糖、酚酞、溴磺酞 钠)对本法有明显干扰,可用 标本空白管来消除。 2、 高脂血症混浊血清也会干扰比 色,先用***抽脂后再做。
八、方法学评价 准确性高 重复性好 优点 干扰少 试剂稳定 操作简便、快速 缺点 灵敏度较低 手工和自动化都可,已被推荐 为测定血清总蛋白的参考方法。
白蛋白测定 白蛋白是血浆中含量最多的蛋白质。其测定方法主要有盐析法、电泳法、染料结合法、免疫法等。
(一)、盐析法 蛋白质分子表面因有水化膜的保护而稳定,如果加入大量中性盐则电荷被中和、水化膜被破坏,蛋白质分子因相互聚积而沉淀析出,此种现象称为盐析。
球蛋白分子量较白蛋白大,相等重量的表面积要小,电荷和水化膜也少,故先被沉淀下来,而白蛋白仍留在溶液中,可用测定总蛋白的方法测定之。
常用的中性盐有半饱和硫酸铵、23%硫酸钠、双硫酸(%% 亚硫酸钠溶液) 准确性差、操作烦琐,且不宜用自动生化分析,基本不用。
(二)电泳法 醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳。 特异性高,准确性不够,操作烦琐费时,且不宜用自动生化分析
(三)染料结合法 根据白蛋白结合外源性染料的能力比球蛋白大,故在不分离白、球蛋白的条件下用染料直接测定白蛋白。 有干扰,但灵敏度高、操作简便、重复性好,自动生化分析仪常用的方法。
(四)免疫学法 免疫扩散法、免疫比浊法(透射比浊法和散射比浊法)、放射免疫法。 特异性好、灵敏度高,但成本较高,费时,一般用于尿液和脑脊液中微量白蛋白的测定。
溴甲酚紫测定血清白蛋白 一、原理:,溴甲酚紫(BCP)可与白蛋白结合形成绿色复合物,在603nm波长处有一吸收峰,与同样处理的白蛋白标准比较,便可计算血清中的白蛋白浓度。
二、 主要试剂: BCP 乙酸钠 用乙酸调pH 乙醇 Brij-35 白蛋白标准:40g/L
三、操作步骤 加入物(ml) B S×2 U×2 血清 / /