文档介绍：荧光荧光第三部分演示文稿
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（优选）荧光荧光第三部分
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1. 和氨基反应的
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fluorescein-5-isothiocyanate (FITC Number/Name: 82354-19-6 / 1H,5H,11H,15H-Xantheno[2,3,4-ij:5,6,7- i'j']diquinolizin-18-ium, 9-[2(or 4)-(chlorosulfonyl)-4(or 2)-sulfophenyl]-2,3,6,7,12,13,16,17- octahydro-, inner salt
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Spectra — Texas Red-BSA conjugate Absorption and fluorescence emission spectra of the Texas Red conjugate of bovine serum albumin (A-23017) in pH buffer.
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牛肺动脉内皮细胞微丝成像
用Alexa Fluor 430标记抗体实现微丝染色
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斑马鱼视网膜
绿色：Alexa Fluor 488标记
蓝色：Hoechst 33258染核
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2. 和巯基反应
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Alexa Fluor 488 C5 maleimine
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5-(bromomethyl)fluorescein
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Tetramethylrhodamine-5-maleimide
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Alexa Fluor 350, 488, 568：核、微管、特殊蛋白
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3. 标记其他基团
羟基：蛋白质中丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基；糖类
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NBD-Cl
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肼和芳香胺用来标记醛、酮
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APTS
Fluorescein-5-thiosemicarbazide
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九、荧光分析方法
常规荧光分析法
三维荧光分析法
时间分辨荧光分析法
能量转移荧光分析法
荧光免疫分析
超灵敏技术（信号放大）
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1、常规荧光分析法
荧光生成/增敏法
荧光猝灭法
同步荧光分析法
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（1）、荧光生成/增敏法
1. 待测物本身有荧光，可以直接进行测定
2. 待测物没有荧光或荧光较弱，则反应产生荧光衍生物进行测定
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荧光强度与物质浓度的关系
It=AI0e-kcl
dI=AI0 e-kcx－AI0 e-kc(x+dx)
= AI0 e-kcx(1－e-kcx)
因dxkc很小
dI=A I0kc e-
dF=KdI
=KAI0kc e-kcxdx
液槽中溶液荧光强度
F= KAI0kc∫0l e-kcxdx
= KAI0[1－e-kcl]
=AKI0[kcl－(kcl)2/2!+(kcl)3/3! －…]
= AKI0kcl[1－kcl/2+(kcl)2/6 －…]
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当kcl≤
F= AKI0kcl 对1cm2吸光截面
F= φI0εcl
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（2）、荧光猝灭法
待测物没有荧光，但它可以通过动态猝灭或静态猝灭的过程使一荧光物的荧光猝灭进行测定。
如： O2猝灭芘丁二酸的荧光，用于测定血液中的氧
     S2-猝灭荧光素汞的荧光用于测定环境中石油及天然气中的痕量硫
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（3）、同步荧光分析法
同步荧光是在同时扫描两个单色器波长的情况下测绘的荧光光谱，根据激发和发射两个单色器在同时扫描过程中彼此间所应保持的关系，同步荧光测定可分为三个类型：
1．  固定波长同步荧光，在同时扫描过程中使激发波长和发射波长彼此保持固定的波长间隔，即λem-λex =常数。
2．  固定能量同步荧光，在同时扫描过程中使激发波长和发射波长之间保持一个固定的能量差（1/λex-1/λem）X107=△v=常数
△v表示能量差（cm-1）即激发和发射两个单色器之间保持固定波数差进行扫描
可 变角（或可变波长）同步荧光：在同时扫描