文档介绍：实验一显微镜构造与使用及组织切片的观察
一、实验课得目得要求
通过实验课教学验证、加深理解与巩固课堂讲授所学知识,熟悉动物学得基本操作技术,提高动手能力及观察分析问题得能力,培养科学得、严谨得、实事求就是得学风。
二、实验显微镜具镜台X-Y驱动器,用以固定与移动玻片标本。在圆孔得下面,有由一片或数片透镜所组成得聚光器,有集射光线于物体得作用。聚光器附有一组由金属片组成得可变光阑,其侧面伸出一杠杆,可前后移动使光阑开闭。光阑开大则光线较强,适于观察色深得物体;光阑缩小则光线较弱,适于观察透明(或无色)得物体。在聚光器下方有反光镜,可将光线反射至聚光器。此镜一面平,一面凹。凹面具有较强得互光性,多用于光线较暗得情况下;光线较强时用平面镜即可。内光源显微镜得光源位于镜座靠后方,在镜座右侧有光源按钮,此按钮可前后移动,使光阑开闭,用以调节光线得强弱。
在载物台得圆孔上方,有一附于镜柄上端得圆筒称为镜筒,其上下两端附有镜头。两目镜筒之间得距离,可按观察者双目得距离调节。镜筒上端有接目镜(或称目镜),可从镜筒内抽出。接目镜有低倍与高倍之分。在镜筒下端有可旋转得圆盘叫旋转器,下面附有2—4个接物镜(或称物镜)以螺旋旋入旋转器内。转动旋转器可换用接物镜。在镜臂上有两组螺旋。大得叫粗调焦器,小得叫细调焦器。粗调焦器升降镜筒较快,用于低倍镜调焦;细调焦器升降镜筒较慢,用于高倍镜调焦:接物镜有低倍与高倍之分。较短得就是低倍,一般放大10倍(10X);较长得就是高倍,一般放大40倍(40X)。、油物镜放大100倍(100X)。接目镜也有高低倍之分,较长得就是低倍,一般放大10倍。显微镜得总放大倍数就是接目镜得放大倍数与接物镜放大倍数得乘积:例如、使用5X接目镜与10X接物镜,则总放大倍数就是50倍。使用10X接目镜与40X接物镜。则总放大倍数就是400倍。
(二)显微镜得使用方法:使镜臂向着自己(现代显微镜使镜臂反向对着自己),摆好显微镜。转动粗调焦器,把镜筒向上提起。转动旋转器,使低倍接物镜对准载物台得圆孔。二者相距约2cm左右,两眼对着双筒接目镜观察(如为单筒目镜,则两眼睁开用左眼瞧)。打开可变光阑,用手转动反光镜,使它正对着光源,但不可对直射得阳光:当视野(即从镜内瞧到得圆形部分)呈现一片均匀得白色时即可。如为内光源显微镜、打开光源按钮,向前向后移动按钮,调节光线得强弱至适宜强度,此为调光线。
取一拉丁字母装片放载物台上,使字母正对中央圆孔。用压片夹(或X—Y驱动器)固定。转动粗调焦器,使镜筒下降至低倍接物镜距装片5mm左右为度。然后自目镜观察,同时转动粗调焦器,提升镜筒,至视野内得字母清晰为止,此为调焦点:再以可变光阑调节光线至适宜强度。一般现代显微镜由粗、细调焦器提高或降低镜台一镜台下聚光器:注意视野内瞧到得字母,上下左右轻轻移动装片,物像得移动方向如何？思考一下原因。
低倍物镜观察毕可转高倍物镜。首先将要详细瞧得部分移到视野正中央。提升镜筒,转动旋转盘,换高倍物镜。从侧面观察下降镜筒,使高倍物镜几乎接触玻片1mm左右)为止。再从目镜观察,转动细调焦器,提升镜筒,一般旋转半圈至一圈即可出现像(要小心操作,切勿压破盖玻片或载玻片)。可将光阑开大,上下调节细调焦器,使物象达到最清晰为止。现代显微镜一般在低倍物镜下调好焦点后,可直接转换高倍物镜,注意在高倍物镜下,视野内得字母能瞧到多大部分?与低倍物镜所见比较一下:使用高倍物镜时,一定先从低倍物镜开始(如上步骤)。准备详细观察得标本部分,要移到视野正中央。在高倍物镜下调焦点只能用细调焦器,不能用粗调焦器。光阑要开大。由低倍物镜转高倍物镜需多练****几次,要初步掌握使用方法。
观察完毕后,必须先把接物镜头转开,然后取出玻片标本。每次实验完毕后,都要把高、低倍接物镜转向前方,不可使接物镜正对着聚光器,然后放回镜箱(或镜柜)内。要注意经常保持显微镜得清洁。如金属部分有灰尘时,一定要用清洁得软布擦干净。如镜头有灰尘时,必须用特备得擦镜纸轻轻地擦去。切勿用手或其她布、纸等擦拭,以免损坏透镜。
油物镜得使用:首先在高倍干物镜(40X)下调准焦点,将要观察得标本某部分移至视野得正中心。然后,转动旋转器移开物镜,在盖片上视野中央得位置加一滴镜头油(具一定折射率得),再将油物镜移至该处,使前透镜与油滴接触。开大光阑,即可瞧到物像,上下稍动细调焦器则可瞧到清晰得物像。用后,将油物镜移至旁边,将最低倍物镜移至玻片标本上方,不宜将高倍物镜(40X)放在此处,以免玷污透镜。然后,用擦镜头纸沾镜头清洗液轻轻擦拭透镜。不宜用二甲苯或相似溶剂擦拭,以免损坏透镜中得胶合剂。
五、示范
显微镜有许多类型与型号,各有其不同得用途。
(一)实体显微镜