文档介绍：红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
羄
莄艿
聿袀
聿薃
莅螅
袁腿
肂
1 / 131
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
；
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验000转离心5min。吸出血清上清液。
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
羄
莄艿
聿袀
聿薃
莅螅
袁腿
肂
5 / 135
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
’.
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
羄
莄艿
聿袀
聿薃
莅螅
袁腿
肂
13 / 1313
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
；
d〕拿出一块96孔血凝板，在第一列每孔参加 50uLPBS缓冲
,吸出50uL办理好的血清，做2倍稀释，参加50uL红细胞悬液，室温静置30-60min,察看试验结果，假如红细胞堆积，证明血清中非特异性凝聚素去除洁净〔去除非特异性凝聚用红细胞种类与下一步试验用红细胞种类一
致〕。
2〕红细胞悬液配制
1〕液全称为Alsever氏液。配制方法为葡萄糖、柠檬酸钠、柠檬酸、氯化钠、去离子水加至
100mL，微热溶解，将pH值调到，8磅20min高压灭菌，4℃
储存备用。
2〕将含有红细胞的液，离心5min〔火鸡/鸡红细胞
1800rpm；人“O〞型、豚鼠红细胞2000rpm，不一样离心计转速
稍有不一样〕，弃上清。
3〕参加等量的PBS缓冲液清洗，充足混匀，离心 5min〔转
速同上〕，弃上清。 PBS缓冲液清洗三次。最后一次清洗后，
离心10min〔转速同上〕，弃上清。
4〕吸出适合体积的红细胞，用PBS缓冲液配制成工作浓度
为1%红细胞悬液。
流感毒株HA滴度的测定
1〕在微量血凝板的第2~12列参加50μLPBS缓冲液。
2〕在第一列〔A1~G1〕中参加100μL病毒悬液。
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
羄
莄艿
聿袀
聿薃
莅螅
袁腿
肂
7 / 137
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
’.
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
羄
莄艿
聿袀
聿薃
莅螅
袁腿
肂
13 / 1313
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
；
3〕H1参加100μLPBS，作为红细胞阴性比较。
4〕从第一列各孔吸50μL病毒液，由第1列至第12列做2倍系列稀释，最后一列每孔弃去50μL。
5〕在每孔中参加50μL红细胞悬液，轻拍血凝板，充足混匀。
6〕室温孵育，鸡和火鸡红细胞静置25-30min后察看结果，人“O〞型和豚鼠红细胞45-60min后察看结果，并记录。
HA试验结果判断
惹起所有红细胞凝聚为完整凝聚，以 “+记〞录；只有局部红细胞
凝聚记录为“+/-〞；无凝聚记录“-〞。血凝滴度的判断以出现完整凝聚
的最高稀释度为终点，其稀释度的倒数即为病毒的血凝滴度。

病毒稀释度
HA滴
1:
1:
1:
1:
1:1
1:3
1:6
1:12
1:25
1:51
1:102
1:204
度
1
2
4
8
6
2
4
8
6
2
4
8
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
A
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
2
B
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
8
C+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
16
D+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
32
E+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
64
F
+
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
128
G
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
≥2048
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
红细胞凝聚及红细胞凝聚克制试验
羄
莄艿
聿袀
聿薃
莅螅
袁腿
肂
9 / 139
红细胞凝聚及红细胞凝