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骨髓细胞形态学检验.ppt

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骨髓细胞形态学检验.ppt

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文档介绍

文档介绍:第三节 血细胞形态学特征
一、血细胞发育过程中形态学演变的一般规律
血细胞发育:从原始到成熟有一定的规律性
1、细胞体积
(1)胞体由大到小(普通规律)
(2)特殊规律:早幼粒大于原粒细胞
反应。
3、意义:
(1)多毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCE)诊断:HCL为阳性不被L-酒酶抑制
(2)T-B淋巴细胞鉴别:T阳性,B阴性
(3)协助鉴别Gaucher病与Niemann-Pick病:Caucher阳性,Niemann-Pick阴性
(4)单核细胞、组织细胞、网状细胞、巨核细胞ACP阴性。
(四)氯化醋酸AS-D茶酚酯酶染色
1、原理:
AS-D(SE)——氯化醋酸AS-D茶酚——AS-D+重氮盐GBC偶联——红色沉淀定位于胞浆中
2、结果:粒系——阳性或强阳性反应
单核——阴性或弱阴性反应
淋巴、嗜酸细胞、浆细胞——阴性反应
3、意义:
(1)急粒——阳性或强阳性
(2)急单、急淋——阴性反应
(五)α-醋酚茶酚酯酶染色
1、原理:α-NAE——α-醋酸茶酚——α-茶酚+重氮盐染料偶联——黑色沉淀定位于胞浆中。
2、结果:
1、单核细胞——阳性(灰黑色沉淀)
2、粒细胞——弱阳性
3、淋巴细胞——阴性
3、意义:
1、急单——强阳性反应
2、急粒——弱阳性反应
(六)糖原染色
1、原理:PAS反应
过典酸(糖原)——醛基+无色品红——紫红色化合物
2、结果:
(1)阳性:颗粒状、小块状或弥漫均匀红色
(2)分为:强阳性、弱阳性和阴性或阳性百分率
(3)粒系:
①原粒阴性,早幼粒以下阶段阳性反应程度渐增强
②单核弱阳性,淋巴细胞阴性
③红系:阴性
④巨核:阳性
3、意义:
1、红血病与巨幼贫鉴别:前者幼红细胞阳性,后者幼红细胞阴性
2、白血病:急粒:阴性或弱阳性
急淋:原幼淋阳性呈粗颗粒状或块状
急单:呈弥漫均匀或细颗粒状
3、其它:
Gaucher细胞——阴性
Niemann--Pick——阴性
(七)铁染色:
1、原理:(1)铁——铁蛋白或含血黄素——单核--吞噬细胞质内
(2)Fe3++亚铁氰化钾——铁氰化铁沉淀(普鲁土蓝)
2、结果:
(1)细胞外铁:一、1+ — 4(+)
(2)细胞内铁:
①含有铁颗粒的幼红细胞——铁粒幼红细胞
②油镜下计数100个幼红细胞计算其阳性率
③I、II、Ⅲ、Ⅳ和环状铁粒幼细胞
3、参考值:
(1)细胞外铁:1+ — 2(+),大多为2+
(2)细胞内铁:20—90%
4、意义:
(1)缺铁性贫血诊断
(2)非缺铁性贫血:如AA、铁粒幼细胞性贫血、溶贫、巨幼贫、内外铁增加
(3)MDS-RARS:环状铁粒幼细胞>15%
四、细胞免疫分型:
1、用单抗和免疫学技术检测细胞表血特异性
2、分化抗原—细胞所属系列、分化程度及功能状态。
(一)检测方法:
1、免疫荧光法(immme of luoresence technique)
(1)原理:
①荧光标记的单抗+细胞表面分化抗原结合——产生荧光
②用荧光显微镜和流式细胞仪检测
③直接荧光法、间接荧光法
(2)参考值:有荧光——阳性细胞
无荧光——阴性细胞
2、免疫酶染色法:
(1)APAAP法(碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法):
一抗+CD抗原+AKP标记二抗——底物显色
(2)PAP法(过氧化物酶抗过氧化物酶法)
一抗+CD抗原+POX标记抗体——底物显色
(3)ABC法(亲和素—生物素—酶复合物)法:
一抗+CD抗原+生物素标记二抗——HRP标记亲和素+底物
(二)细胞免疫分型的临床应用
1、有助于识别不同系列的细胞:
髓系:CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166
淋巴系:CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD77
巨核系:CD41、CD42、CD61
2、识别不同的淋巴细胞:
T系统:CD2、CD3、CD4、CD7、CD8
B系统:CD19、CD20、CD22
NK:CD16、CD56
3、用于T淋巴细胞亚群检测:
T:(CD3)
T