文档介绍：微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
实验目的：
1、学****并初步掌握革兰氏染色法；2、认识革兰氏染色的原理；3、微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
实验目的：
1、学****并初步掌握革兰氏染色法；2、认识革兰氏染色的原理；3、稳固
显微镜的使用。
三、实验原理：
革兰氏染色是1884年丹麦病理学家ChristainGram氏创办的，是细菌学中
最重要的鉴识染色法。染色步骤分为四个部分：
初染：加入碱性染料结晶紫固定细菌图片；媒染：加入碘液，碘与结晶紫
形成一种不溶于水的复合物；脱色：利用有机溶剂乙醇或***进行脱色；复
染：复红配成碳酸复红作为复染剂。
成分
占细胞壁干重的
革兰氏阳性细菌
革兰氏阴性细菌
肽聚糖
含量很高（50~90）
含量很低（~10）
磷壁酸
含量较高（<50）
无
类脂质
一般无（<2）
含量较高（~20）
蛋白质
无
含量较高

微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
微生物革兰氏染色实验报告
G-和G+细胞壁的比较：
阳性（G+）菌细胞壁特点：细胞壁厚，只有一层，主要由肽聚糖组成，肽聚
糖含量高，构造紧密，脂类含量低。当乙醇脱色时，细胞壁肽聚糖层孔径变小，通
透性降低，结晶紫和碘的复合物被保存在细胞壁内，复染后仍显紫色（如芽孢杆
菌）。
阴性（G-）菌细胞壁特点：细胞壁薄，由两层组成，内壁层和外壁层，细胞
壁中脂类中脂类物质含量较高，肽聚糖含量较低，网状构造交联程度低，乙醇脱色
时溶解了脂类物质，通透性增强，结晶紫与碘的复合物易被乙醇抽提出来，因此，
革兰氏阴性菌细胞被脱色，当复染时，脱掉紫色的细胞的细胞壁又着上红色（比如
大肠杆菌）。
实验器材：
1、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。
2、溶液和试剂：革兰氏染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、95乙醇、番红复
染液、水。
3、仪器及其他用品：酒精灯、载玻片、显微镜、接种环、试管架、滤纸、滴
管。
五、实验步骤：
1、取一个载玻片，将其洗净并沿一个方向擦拭洁净，直至液体不再其上收缩
为止；将接种环整平，用灼烧过的接种环在混匀的菌种中取菌，按惯例方法图片，
应涂大，不宜过厚。
2、翻开酒精灯，用火焰固定，不宜烤得太狠，否则菌种呈假阳性。
3、轻旋结晶紫染液滴管，将其旋出，滴加1滴草酸铵结晶紫染液覆盖涂菌部
位（轻晃使其完全覆盖），染色40s。
4、染色达成后倾去染液，水洗至流出水为无色。
5、将玻片上残留水用滤纸吸去，待其干燥。
6、在涂菌部位滴加碘液，覆盖1min。
7、媒染达成后，倾去碘液，水洗至流出水无色。
8、将玻片上残留水用滤纸吸去，待其干燥。
微生