文档介绍：免疫分析法
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特点
结合价（antigenic valence)是指能和抗体分子结合的抗原决定簇的总数。
半抗原为一价
天然抗原的分子结构复杂，分子表面有多个决定簇为多价
构象决定簇：序列上不相连而依赖于蛋白
质或多糖的空间构象形成的决定簇，多暴
露于分子表面。
顺序决定簇：一段相连的氨基酸序列所形
成的决定簇，多位于抗原分子内部。
功能性AD：分子表面，易被识别。
隐蔽性AD：分子内部。
B细胞决定簇：分子表面。
T细胞决定簇：分子内部。
二、AD的分类
三、共同抗原和交叉反应
两种来源不同的抗原，除各有其主要的特异性抗原决定簇外，相互之间也存在部分相同的抗原决定簇，这种共有的抗原决定簇称为共同抗原。
亲缘关系很近的生物之间存在的共同抗原称为类属抗原。
无种属关系的生物之间存在的共同抗原称为异嗜性抗原。
一种共同抗原刺激机体产生的抗体，可与其他含有共同抗原的物质发生结合反应，称为交叉反应。
药物分子的抗原性
1、药物分子的免疫原性
大多数的药物分子通常都是半抗原；
一些蛋白类药物、多肽类药物、激素类药物大部分属于完全抗原。
2、药物分子的抗原特异性
药物分子和蛋白质载体结合后，抗原特异性可能会发生改变。
3、药物分析中，为了得到高效价的抗血清，通常会与蛋白质载体合***工抗原进行试验。
常用载体：牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OA）、破伤风类***（TT）、钥孔蛋白（KLH）等。
（1）半抗原和载体结合的化学反应
多肽类激素：活化蛋白质或多肽的游离羧基形成肽键；与蛋白质或多肽的游离氨基缩合形成肽键
甾体：甾体激素的羟基和***基不能直接和载体蛋白形成有效的共价键，需要制备甾体的衍生物，通过含游离羧基的甾体衍生物与载体蛋白相连
抗生素：ß-内酰***环在偏碱性条件下可以与蛋白质的自由氨基以酰***键的形式共价结合；氨基糖苷类抗生素用碳化二亚***为连接剂实现药物和载体蛋白的连接
在选择结合半抗原的化学反应时，应考虑不同的连接方式可能对抗体的专一性产生不同的影响。
半抗原没有可以结合的官能团时需要合成适当的衍生物。
为得到特定抗原决定簇相对单纯的合成抗原，需要根据半抗原的化学特性及连接产物的化学特性选择连接的半抗原。
（2）半抗原和载体的选择原则
半抗原选择原则：
最好含有芳香结构；
应考虑抗原抗体反应的微环境；
合理利用分子类似物之间的交叉反应。
载体选择原则：
应考虑载体对检测系统的影响：选择的载体应和检测体系不发生交叉反应；用于包被合成抗原的载体和用于免疫动物产生抗体的合成抗原的载体蛋白不同。
免疫过程中考虑载体效应的影响：抗体的特异性依赖于半抗原分子结构中的免疫决定区，但整个载体蛋白大分子对于抗体反应的性质和量也有影响；应使用相同载体的合成抗原制备半抗原抗体。
（3）合成抗原的测定
定性测定方法：
光谱分析：半抗原和载体蛋白的结合导致蛋白构象的改变，改变程度和半抗原的结合量有关，半抗原结合量越大，构象改变程度越大。
热力学分析：半抗原和载体蛋白结合后热力学特征会有变化，差异可通过差示扫描量热法（DCS）等方法测定。
定量测定方法
相对含量测定法：通过ELISA法比较半抗原与载体蛋白的相对结合量。
绝对含量测定法：半抗原具有与载体蛋白完全不同的广谱吸收特征，且半抗原在此特定波长下具有较强的吸收；或能利用特定的化学反应定量测定半抗原的量，且不与载体蛋白发生反应。
一、概述
二、抗原
三、抗体与免疫反应
四、免疫分析方法及应用
五、免疫扩散法
主要内容
免疫分析实际上是一种特殊的试剂分析，
特点是抗体/抗原成为分析试剂。
1、抗体的结构与功能
抗体泛指机体经抗原刺激由免疫活性细胞产生的一组免疫球蛋白，通常由两条相同的重链和两条相同的轻链组成
常用的是IgG分子，其在血清免疫球蛋白中的含量约70%
1. 抗体（antibody, Ab）功能性概念
是由抗原刺激而产生并能与刺激其产生的抗原发生特异性结合的、具有免疫功能的球蛋白。抗体主要存在血清中，也存在于呼吸道粘膜液、小肠粘膜液、唾液以及乳汁等其它体液中。
2. 免疫球蛋白（immunoglobulin, Ig）结构性概念
具有抗体活性或化学结构与抗体分子相似的球蛋白。所有抗体都是免疫球蛋白，但是并非所有免疫球蛋白都是抗体。
免疫球蛋白的基本结构
IgG分子基本结构是由四个肽链组成的，二条