文档介绍：免疫学应用实验
一、 E-玫瑰花环形成实验
掌握人T淋巴细胞形成E-花环的实验原理和操作方法；
熟悉T淋巴细胞的功能检测方法。
二、 中性粒细胞吞噬功能测定
掌握中性粒细胞吞噬金黄色葡萄球菌实验的操作过程；瑞氏染色的基本 步骤及吞免疫学应用实验
一、 E-玫瑰花环形成实验
掌握人T淋巴细胞形成E-花环的实验原理和操作方法；
熟悉T淋巴细胞的功能检测方法。
二、 中性粒细胞吞噬功能测定
掌握中性粒细胞吞噬金黄色葡萄球菌实验的操作过程；瑞氏染色的基本 步骤及吞噬百分率的计算。
三、 抗原抗体反应及免疫学标本片的观察
掌握抗原抗体反应的特异性；熟悉凝集反应的原理、方法和分类。掌握 胶乳凝集试验的原理，熟悉试验方法，了解其应用；熟悉沉淀反应的原理； 熟悉双向琼脂扩散、单向琼脂扩散的操作方法和结果分析。
凝集反应
类风湿因子的检测
沉淀反应
观察琼脂中抗原与抗体反应的单扩和双扩的试验现象
A单向琼脂扩散试验
操作方法：
• • • . •
O。■⑥■
制备含抗IgG抗体的琼脂板:溶化的3%琼脂、待冷至56°C时吸取1. 5ml琼脂 与等量适当稀释的抗IgG抗体混合均匀。倾注于水平放置的塑料板上，制成厚薄
均匀的琼脂板。凝固后用打孔器打孔二 排，每排5孔、孔距8—10mm,孔要圆整 光滑。
图示单向琼脂扩散试验模式
加样:用微量加样器加样。
结果分析：
标准曲线的绘制及血清标本中IgG含量的测定。
以各稀释度标准抗原孔沉淀环直径为横座标，相应孔中IgG含量为纵座标在 半对数座标纸上作图，画出标准曲线。
依待检血清标本孔沉淀直径，查标准曲线，将查得的唾G含量乘以标本的稀 释倍数，即为血清中IgG的含量。
B双向琼脂扩散试验
操作方法：
将1%生理盐水琼脂加热溶化。
制备琼脂板:取洁净载片一片，放一水平台上，将溶化的2-5ml琼脂趁热用 吸管注于玻片上，使其自然流成平面，琼脂凝固后用打孔器打孔，去掉孔中的琼 脂。
加样：中央孔中加入甲胎蛋白（AFP）诊断血清，1、4孔加肝癌病人阳性血清,
2、3、5、6孔加待检血清。加血清至满勿外溢。不可有气泡。
加样后，将掠脂板放入有一定湿度带盖容器中，置37°C温箱，24小时观察结 果。
结果分析：
1、4孔为阳性对照孔（加已知阳性标本），与中央孔间出现乳白色沉淀线。
其余各孔与中央孔如出现沉淀线，且一端与阳性对照沉淀线相吻合者为阳性。 证明该份血清含有甲胎蛋白。如两条沉淀线相交，表明二者抗原性不同，出现的 沉淀线另一种抗原抗体反应，不能判定阳性。
如待检孔与中央抗体孔间未出现沉淀线为阴性，证明待检血清中没有甲胎蛋 白。
1
O
6 O /~ ° 2
/ O '
5— O 3
O
4-
图示双向琼脂扩散试验结果
2、6孔:吻合沉淀线（阳性）。
5孔：交叉沉淀线（阴性）。
3孔：无沉淀线（阴性）。
四、巨噬细胞吞噬功能试验掌握巨噬细胞的生物学功能；熟悉巨噬细胞吞噬功 能试验的原理和操作方法。
实验原理：
巨噬细胞具有吞噬大颗粒异物的特性，通常选用鸡红细胞作为吞噬颗粒，将其注 入小鼠腹腔中，腹腔中巨噬细胞则将鸡红细胞吞入。取小鼠腹腔液涂片、染色后 可见鸡红细胞被吞噬的现象，计数100个吞噬细胞中吞噬鸡红细胞的细胞数可判 断其吞噬