文档介绍：医械生物学评价实验
GB/T 16886 《医疗器械生物学评价》 系列标准
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国药典中规定的新鲜精制植物油（如棉籽油或芝麻油）；
其余介质：乙醇/水、乙醇/生理盐水、聚乙二醇400（稀释至生理渗透压）、二***亚砜和含血清培养基。
浸提液制备的注意事项
浸提应在搅拌的条件下进行。当认为静态适宜时，应对试验方法加以论证、规定并出具报告。
如可能, 液体浸提液应在制备后立即使用, 以防止吸附在浸提容器上或成分发生其他变化。
不应调整浸提液的ph值除非给出理由。
浸提液一般不应采用过滤、离心或其他方法来去除悬浮的粒子，如果必须进行时，应说明其理由。
浸提液制备的注意事项
对于在使用条件下不是可溶解和再吸收的材料和器械，进行浸提的任何溶剂不应导致聚合物发生分解。聚合材料在挥发性溶剂中只应发生轻微变软（如小于10%的溶解度）。
如果器械是不能浸提的水状液体，可用液体直接进行试验。
在正规使用条件下液体是在器械内循环，可以采用循环方式进行浸提，尽可能加大一个或多个实验条件，如温度、时间、体积、流速。选择这种浸提方式的基本原理应该在报告中注明。
细胞毒性试验
细胞毒性试验
现有版本是GB/-2005（ISO10993-1999），GB/-20xx（ISO10993-2009）正在报批中。
敏感性高、重现性好，结果有一定的临床相关性，因此被广泛地应用于医疗器械生物学评价中，特别是作为新材料筛选时的必做试验。国内外无论哪项医疗器械生物学评价标准中都把细胞毒性试验列为首位，作为首选项目。
概述
定义：该试验采用已建立的细胞系（ATCC CCL1(NCTC clone 929)）, 测定由器械、材料和/或其浸提液造成的细胞溶解(细胞死亡)、以及对细胞生长的抑制和其他影响。
意义：该试验属体外试验，能在短期内检出供试品对细胞新陈代谢功能的影响，对毒性物质具有较高的敏感性，从而能快速筛选材料。因此，细胞毒性试验为生物学试验中首选试验项目。
（一）评价类型简介
医疗器械的细胞毒性可以有以下二种评价类型：
1. 按不同生物学终点评价
(1) 细胞形态学评价：定性检测方法，结果评价相对比较初浅，通常仅作为一种辅助或补充的方法。
(2) 细胞膜效应评价：中性红染色法，台盼兰染色法，荧光素染色法等。
(3) 细胞生长能力评价：细胞增殖度测定。
(4) 细胞代谢特性评价：ＭＴＴ法、各种测定细胞总蛋白量，蛋白质合成率和酶活性的方法。
2. 按不同接触方式评价
(1) 浸提液方式：将供试品浸在介质介质中，经过一定的时间和温度的作用，取其浸提液与培养的细胞接触。
(2) 直接接触方式：将供试品直接与培养的细胞接触。
(3) 间接接触方式：将细胞与供试品隔开，在该体系中上层的供试品可以通过中间介质中的孔隙影响下层的细胞。包括琼脂扩散试验、滤膜扩散试验。
常用的细胞毒性试验
MTT （四唑盐）法：哺乳动物细胞的线粒体酶可将黄绿色的MTT降解形成蓝紫色的物质，用二***亚砜（DMSO）将其溶解成溶液，用酶标仪测定其浓度，从而定量测定细胞的存活比例。
该试验用于细胞毒性定量评价。
对该试验有干扰的供试品不适于本试验。
浸提方法
常用浸提方法举例：按照4g/20ml浸提介质的比例，浸提介质为含血清的细胞培养基，（37±1）℃，（24±2）h。
注意：浸提液接触细胞之前，如果进行过滤、离心等处理，应详细记录并对这些步骤加以说明。宜避免对浸提液进行处理，例如对pH值的调整，因为这会影响到试验结果。
细胞毒性结果分析
定性评价：分级达到2级以上时被认为有细胞毒性效应。
定量评价： 细胞活性下降大于 30%被认为有细胞毒性反应。
细胞毒性结果评价
细胞毒性仅仅是一种最初的信号，它预示存在体内毒性的可能性，事实上单凭细胞毒性数据还未必能确定该器械一定不适用于特定的临床应用
在对细胞毒性的结果评价时需要结合其他生物相容性数据和产品的预期用途进行综合评价。
在解释试验数据时还必须考虑到该试验系统的局限性。
刺激试验
刺激是不涉及免疫学机制的一次、多次或持续与试验材料接触所引起的局部炎症反应。
要测定器械、材料及其潜在可溶出物的刺激作用，试验的进行应与使用或接触的途径和持续时间相适应。
刺激试验具有较高的敏感性，是医疗器械三项基本生物学评价项目之一。
刺激试验类型
皮肤刺激
皮内反应
特殊的刺激试验：眼、口腔、***、直肠和***刺激等
注：
任何显示为皮肤刺激物或pH≤≥