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微生物学实验教案.doc

文档介绍

文档介绍:革兰氏染色法
一、 [目的要求]
了解革兰氏染色的原理;掌握革兰氏染色的方法。
二、 [实验原理]
根据革兰氏染色反应的结果,可将所有细菌分为两类:呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细 菌,用G+表示;呈红色的称为革兰氏阴性细菌,用G表示;
革兰氏染色法
一、 [目的要求]
了解革兰氏染色的原理;掌握革兰氏染色的方法。
二、 [实验原理]
根据革兰氏染色反应的结果,可将所有细菌分为两类:呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细 菌,用G+表示;呈红色的称为革兰氏阴性细菌,用G表示;
三、 [实验步骤](插片法)
涂片
固定
染色
干燥
镜检
四、 [实验报告]
实验结果
报告所观察到的两种细菌革兰氏染色的结果并绘图。
思考题
革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚?
革兰氏染色成败的关键在哪一步?为什么?应如何掌握?
实验四微生物大小的测定及计数
一、 [目的要求]
1学****并掌握用测微尺测定微生物大小的方法。增强微生物细胞大小的感性认识。
明确血球计数板计数的原理
掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。
二、 [实验原理]
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。微生物大小
的测定在显微镜下,借助于特殊的测量工具一测微尺,包括目镜测微尺和镜台测微尺。显 微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻上 (又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
三、 [实验步骤]
目镜测微尺的标定
菌体大小的测定
用毕后处理取出目镜测微尺,将目镜测微尺和镜台测微尺用襟镜纸襟试干净,放回 盒内保存。
稀释
镜检记数室
显微镜记数
清洗血细胞记数板
四、[实验报告]
实验结果
将测得的菌体大小值填入表中。
思考题
若目镜和目镜测微尺不便,只改用不同放大倍数的物镜测定同一菌体时,其测定结果 是否相同?为什么?
根据你实验的体会,说明用血细胞记数板的误差主要来自哪些方面?应如何尽量减 少误差,力求准确?
实验五 牛肉膏蛋白***培养基的制备
一、 [目的要求]
明确培养基的配制原理。
通过对基础培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤。
了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围。
学****高压蒸汽灭菌的操作方法。
二、 [实验原理]
牛肉膏蛋白腺培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通 培养基,由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供 作微生物生长繁殖之用。基础培养基含有牛肉膏,蛋白腺和NaCL其中牛肉膏为微生物提 供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白月东主要提供氮源和维生素,而NaCl提供无机盐。由
于这种培养基多用于培养细菌,因此要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细 菌的生长繁殖。
高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅 隔套间的水沸腾而产生蒸汽。从而使沸点增高,得到高于100°C的温度。导致菌体蛋白质 凝固变性而达到灭菌的目的。
三、 [实验步骤]
称量
溶化
3 .调 PH
过滤
分装
加棉塞
包扎
灭菌
搁置斜面
无菌检
灭菌
四、[实验报告]
实验结果
记录本实验配置培养基的名称、配方、配制