文档介绍：CDC实验
实验原理
细胞表面抗原与相应的抗体（IgG1〜3或IgM）特异性结合形成的免疫复合物，可通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。因此，水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞，染成蓝色，为阳性反应；不带抗原的细胞，未CDC实验
实验原理
细胞表面抗原与相应的抗体（IgG1〜3或IgM）特异性结合形成的免疫复合物，可通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。因此，水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞，染成蓝色，为阳性反应；不带抗原的细胞，未损伤，不染色，为阴性反应。
实验步骤

颈椎脱臼法处死小鼠
!
暴露胸腔，分离出胸腺
!
镊子夹住胸腺反复轻轻研磨
!
单个细胞
PBS 洗 2 次，1000rpm，10min
!
加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液
调节细胞浓度至3-4X 107/ml
第一组
第二组
第三组
第四组
试剂
LC+ALS+C
LC+ALS
LC+c
LC
LCJ i)
50
50
50
50
ALS(m i)
50
50
PBS(m i)
50
50
37»c 孵育 30 min
C(M i)
100
100
PBS(m i)
100
100
37c 孵育 30 min

细胞膜穿孔的细胞呈蓝色，细胞膜完整的活细胞不着色。
细胞毒性作用的判断标准如下：
阴性反应（一）死细胞占0-10%
可疑阳性反应（土）死细胞占11-20%
弱阳性反应（+ ）死细胞占21-50%
阳性反应（++ ）死细胞占51-80%
强阳性反应（+++ ）死细胞占81-100%

第一组
第二组
第三组
第四组
（LC+ALS+C ）
（LC+ALS）
（LC+C）
（LC）
+++
—
—
—

.第①组成阳性的原因：实验中加入抗原、抗体、补体、LC。抗原抗体能形成抗原抗体免疫复合物，通过经典途径激活补体，形成攻膜复合物，