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还原糖和总糖的测定.doc

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还原糖和总糖的测定.doc

上传人:b14m4c87 2017/5/16 文件大小:116 KB

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还原糖和总糖的测定.doc

文档介绍

文档介绍:生物化学综合实验报告题目: 3,5- 二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖姓名:学号: 同组成员: 分院(系): 专业班级: 指导教师: 完成日期:年月日 1. 实验目的用比色法测定山芋中还原糖和总糖含量 2. 实验原理先用已知浓度的葡萄糖标准溶液与 DNS 反应测其分光度,制得标准曲线, 在测山芋中糖与 DNS 反应后的分光度 A 从而得其总糖和还原糖含量。 3. 实验仪器和试剂试剂: 1g/L 葡萄糖标准液、 3,5- 二硝基水杨酸、 6mol/L HCl , 6mol/L NaOH 仪器: 25,100ml 容量瓶、 1,5ml 吸量管、 50ml 移液管、 100m l 量筒、试管、滴管、离心管、玻璃棒、洗耳球、 100ml 容量瓶、比色皿离心机、分光光度计、恒温水箱 4. 实验步骤一、取六只比色管向其中加入葡萄糖标液 0、 、 、 、 、 毫升在加入蒸馏水 、 、 、 、 、 毫升,最后向其中各加入 DNS 试剂 毫升混合均匀后 100 摄恒温水浴 5min ,冷却后加入蒸馏水至 25ml 刻度线,用 1 号样调零,测其分光度,制得标准曲线。二、还原糖提取:取 3g 山芋粉,加入 30ml 水,搅匀后在 50 摄水中保温 20min ,离心,取滤液,用 100ml 容量瓶定容得还原糖待测液。总糖提取:取 克山芋粉, 加入试管中吸取 5ml HCL 溶液, 8ml 蒸馏水搅匀, 100 摄下恒温水浴 30min ,冷却, NaOH 调节 PH 至中性,离心,滤液用 100ml 容量瓶定容,得总糖待测液。测定时取 5 支比色管分别加入还原糖 0、 、 、0、0毫升, 总糖 0、0、0、 、 毫升, 蒸馏水 、 、 、 、 毫升, DNS 试剂 毫升 100 摄恒温水浴 5min 后冷却, 稀释至 25 毫升用一号管调节分光度为 0, 测总糖和还原糖的分光度。 5 数据处理葡萄糖标准曲线表管号 012345 含糖总量( mg) 1 葡萄糖标液( ml) 1 蒸馏水( ml) 1 DNS 试剂( ml) 吸光度 山芋中还原糖和总糖测定表管号空白 66’77’还原糖待测品( ml)01100 总糖待测液( ml)