文档介绍：-
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杆状病毒滴度检测
实验概要
本实验介绍了检测病毒滴度的方法。
实验原理
根据噬菌斑数计算病毒滴度。
工具/原料
1. 4% agarose gel：2g a-
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杆状病毒滴度检测
实验概要
本实验介绍了检测病毒滴度的方法。
实验原理
根据噬菌斑数计算病毒滴度。
工具/原料
1. 4% agarose gel：2g agrose   50ml 水，高压灭菌
2×Grace〔unsupplemented〕：〔invitrogen〕 H2O，，定容至100ml，无菌过滤
supplemented Grace：1× Lactalbumin， yeastolate，无菌过滤
4. 高温灭活FBS
主要设备
1. 6孔板
2. 12ml离心管
3. 100ml无菌玻璃瓶
4. 无菌吸管
5. 70℃水浴锅
实验材料
杆状病毒， SF9：5×105cells/ml
方法/步骤
1
无菌条件下，2ml/孔细胞〔5×105cells/ml〕种入6孔板，室温孵育1h使其贴壁，孵育后镜检其贴壁程度；
2
将4% agarose gel放入70℃水浴锅融解，空100ml无菌瓶与2×Grace放入40℃水浴锅预热；
3
将杆状病毒用无血清supplemented Grace梯度稀释：10-1~10-8。
4
弃6孔板上清，快速参加稀释好的病毒，1ml/孔，复孔，室温孵育1h。
5
配置上层琼脂：加20ml高温灭活FBS到2×Grace 100ml，25ml 2×Grace〔含FBS〕 无菌水 4% agarose gel，至预热的100ml无菌瓶，轻轻混匀，放入37℃水浴锅备用；
6
弃6孔板上清，快速加2ml上层琼脂，以防菌层枯燥，静置10-20min使其凝固；
7
将6孔板放入27℃培养箱，培养4－10天；
8
计数板中噬菌斑，直至连续两天无变化，加1mg/，室温孵育2h后计数噬菌斑。
END
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考前须知
病毒滴度〔pfu/ml〕=1/稀释倍数×噬菌斑数×1/每孔接种体积
滴度
①*一物质与一定容量的另一物质产生反响所需的量。
②所谓滴度即病毒悬液的浓度，就是指pfu的数值。
③滴度是稀释度的倒数。例如上例中的 1 ： 180 的稀释度，其滴度就是 180 。
效价是滴度的同义词。效价即滴度，两者通用。当前虽然专业的化学和免疫学词典和专著中对这些词的使用已规化，但在不少书刊的文章中常见误用，如称效价 1 ： 40 之类。
④在化学反响中，指产生*一结果所需标准试剂的量。
⑤为当量浓度的二十分之一。在制碱与制碳酸氢铵中用以表示氨水的浓度。
⑥在免疫学中，指通过血清学方法能显示一定反响的抗体或抗血