文档介绍：#####有限公司
研发部
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辐
照
灭
菌
确
认
方
案
另有规定外，细菌培养 48 小时，逐日点计菌落数，一般以 48 小时的
菌落数报告；霉菌、酵母菌培养 72 小时，逐日点计菌落数，一般以 72 小
时的菌落数报告；必要时，可适当延长培养时间至 5～7 天进行菌落计数并
报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。计算各稀释级供试液的平均菌
落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不小
于 15，则两个平板的菌落数不能相差 1 倍或以上。结果：
批号
样品号
需气菌
霉菌
需气菌
霉菌
需气菌
霉菌
(cfu/件)
(cfu/件 )
(cfu/ 件)
(cfu/ 件)
(cfu/ 件)
(cfu/件 )
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
平均数
批平均初始污染菌为（cfu/件）
总平均初始污染菌为（cfu/件）
校正系数的测定
根据 ISO11737-1 中描述的初始污染菌的确定方法进行试验，测定校正因子，该因子取自对活菌计数的初始污染菌检测技术的验证。
测定依据： ISO11737-1:1995
试验方法：
1）标准菌株准备：取枯草杆菌黑色变种（ATCC9372），传代培养，制成 100cfu/ml 备用。
2）洗脱液准备：无菌***化钠 -蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾，磷酸氢二钠，***化钠，蛋白胨，加水 1000ml，微温溶解，分装，过滤，灭菌。
3）制备悬液稀释液，使中含有 100 个芽孢。向随机抽取的 10 个产品上接种该稀释悬液，并在层流下进行干燥。
4）用洗脱液对接种的产品进行洗脱，测定洗脱的芽孢数，并计算平均值。 100 除以平均芽孢数即为回收率的校正系数。
样品编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
芽孢数
平均芽孢数：
校正系数：
产品释出物的检验
测定依据： ISO11737-1： 1995
试验方法：
标准菌株准备：取枯草杆菌黑色变种（ATCC9372）,白色念珠菌
ATCC10231），传代培养，制成 100cfu/ml 备用。
2)产品处理：取灭菌产品以无菌操作转移到 100mlSCDB 培养基中，30～35℃
培养 24h。
3)接种：以无菌操作接种标准菌于上述产品 SCDB 培养基中， 28～32℃培养出现阳性结果或是至少培养 7 天。用标准平板计数法进行微生物计数（ CFU）。
结果：
微生物 ATCC 接种量（ cfu）产品＋ SCDB＋标准菌对照 SCDB+标准菌
枯草杆菌黑
9372
色变种
白色念
10231
珠菌
结论：。
建立验证剂量
根据初始污染菌的结果和 ISO11137：2006 方法 1 中的表 5，建立合适的验证剂量。具体方法为：
如果一批或更多批次平均初始污染菌等于或大于总平均初始污染菌的两倍，则使用最高批次值；
如果批次平均初始污染菌的每一个小于总平均初始污染菌的两倍，则使用总平均初始污染菌。
根据初始污染菌的测定试验结果，得到该产品三批的批平均初始污染菌和
总平均初始污染菌分别为（ cfu/件）和（ cfu/件），最高批次值为（ cfu/
件），因此选择（cfu/件）作为初始污染菌。
根据 11737-1附录校正过的初始污染菌可通过初始污染菌乘以校正系数求
得，故产品的生物负载估计值为：（cfu/件）。
按照 ISO11137 方法 1 中的表 5 查得该校正过的初始污染菌对应的验证剂量
为 kGy (SAL=10 -2)，指定这个剂量作为灭菌剂量。如果平均