文档介绍：无菌检查方法的验证
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无菌检查方法是为了检查药典要束无菌的制剂及其他制品是否无菌而建立的试验方法,是作为无菌产品批放仔的重要依据及药监部门对无菌声晶质量监管的重要项土因此如何确保无菌检查方法的准确可靠至关重要；而检查方法的要用冲洗液冲洗滤膜,••.••••,冲洗量不得超过lOOOmb,••..•.•••*•••••••
化学中和法「利用化学《生物）专属性夷活"常用中和剂或灾活方法有;对氯基苯甲酸、卵磷脂聚山梨酯-80等。，如B.・-酰胺酶
联合便用苦将以上两种或几种方法组合运用，以消除样品的抑菌性。适用于抑菌作用较强的中西药制剂土
其次按照以下要求制备3组样品：
样品组=选择以上适当的方法中和样品，加入少量验证微生物（接种量少于100?Wu）,
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%-蛋白腺缓冲液，加少量微生物（接种量少于100?cfu）中
阳性对照组：将试验菌株直接接种于培养基中（接种量少于lOOcfu）.
最后结果分析如下*
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样品组与对照组微生物生长数量相似,表明中和剂的中和方式有效消除了样品的抑菌性.（即有兹性），如果对照组与阳桂对照组的微生物数量相似，表明样品预处理I消除样品抑菌性的方法矿检测程序和焙养条件等均不影响微生物生长（即天毒性）卜样品如无抑菌性，省去对照组试验「样品组写阳性对照组直接比较❸样品组微生物生长数量不及阳性对照组微生物生长数量，表明样晶的预处理、试验用器具材料、培养条件等方面存在对微生物生长不利的
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为考查验证方法的稳定性和重现性，验证至少需3：
无菌检查方法验证试验设计
薄膜过滤法;按照药典的要求取每种墙养基规定接种的样品总量技薄膜过滤法过滤*冲洗，.在最后1次的冲洗液中加入小于lOOcfu的试验菌「过滤？取出滤膜接种至硫乙醇酸盐流体培养或改良马丁盛养基中，或将墙系基加室翩肌另取一装有同体积培养基的容器「加入尊量试验菌,作为对照•接照意真的要求的温度布I时间进行墙养.
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直接接种法：取符合直接接种法培养基用景要求的硫乙酵酸盐流体培养基8管，分别接入小于[OOcfu的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌*.枯草芽稚杆菌、生抱梭菌各2管:取符含直接接神法培养基用量要求的改良马丁培养基4管，分别接入水于100?c血的白色念珠菌、黑曲霉各2管洛成中r管接入每支培养基规定的供试品接种量事另I管作为对照？按照药典的要求的温度和时间逐行蝠养右..
结果判断
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同对照管比较，:如含供试品各容器中的试验黄均生长良好4则说明验证通过洌台供试品的任1容器巾的试验菌生长微弱善缓慢或不生长，.。增加墙养基的用量，使用中和剂湘火活剂、更换波膜等方法，
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新GMP检查重点'
■如噗声方岫画演耕源糅濒蜂蚂景翻r械蜻濒解岫h协是产品本身的抑菌性，检查方法的选择，是直接接种法还是薄膜过滤法幕电■•ow.•••.•••8▼••■.F•望.
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无菌检查方法验证的硬件是否具备及是否已经进行了相关的确认前如使用黑曲霉菌是否具有生物安全