文档介绍：第三步：将目的基因导入受体细胞
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将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道 法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是一受精卵。
将的DN***段，位于基因的尾端。
标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛 选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形
成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。
动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性。
动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：
比较项目
细胞融合的原理
细胞融合的方法
诱导手段
用法
植物体细 胞杂交
细胞膜的流动性 细胞的全能性
去除细胞壁后诱 导原生质体融合
离心、电刺激、 振动，聚乙二醇 等试剂诱导
克服了远缘杂交 的不亲和性，获得
杂种植株
动物细胞 融合
细胞膜的流动性 细胞的增殖
使细胞分散后诱 导细胞融合
除应用植物细胞 杂交手段外，再加
灭活的病毒诱导
制备单克隆抗体 的技术之一
单克隆抗体
单克隆抗体的制备过程:
I 杂交整细胞 |
］细胞培养
一择活养细胞 I
注入小可 养基
I体内培养I I体，卜培养I
从腹水提取］ I从培养液提
一单克隆抗体1
杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。
单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。
专题3胚胎工程
(-)动物胚胎发育的基本过程
动物细胞培养
概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞,然后放在适
宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
动物细胞培养的流程：
取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)一剪碎
一用胰蛋白酶处理分散成单个细胞一制成细胞悬液
一转入培养瓶中进行原代培养
一贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数目不 断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细 胞的接触抑制。
动物细胞培养需要满足以下条件
无菌、无毒的环境
营养:合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血
浆等天然成分。
温度:适宜温度和pH：
气体环境:95%空气+5%C02。O2是细胞代谢所必需的，C02的主要作用是维持培养液的pH。
动物体细胞核移植技术和克隆动物
哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难)。
选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作;卵(母)细胞细胞质多，营养丰 宜。
体细胞核移植的大致过程是：(右图)
的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称 为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。
胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期,充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
⑶生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体***官的生理变化是相同的