文档介绍：一种从植物中提取和测定血红素的方法
一种从植物中提取和测定血红素的方法
本发明公开一种从植物中提取和测定血红素的方法，包括以下步骤：步骤一、采用***与蒸馏水的混合溶液离心分离，去除叶绿素，然后用盐酸、***与蒸馏水的混合溶液离心分离，得到6C+0. 07506221，计算得 到稀释倍数C，再根据Ci = 0. 5C mg/ml，计算出植物叶片中血红素的浓度Ci。
[0005] 步骤a所述的震荡均匀所需的时间为10_25min，离心条件为离心力4000g、离心时 间 8_20min。
[0006] 步骤a所述的***与蒸馏水的混合溶液I中***和蒸馏水的体积比99 :1，混合溶 液I每次的加入量为l〇ml。
[0007] 步骤a所述的***与蒸馏水的混合溶液II中***和蒸馏水的体积比80:20,混合 溶液II每次的加入量为5ml。
[0008] 步骤b所述的盐酸、***与蒸馏水的混合溶液中盐酸、***和蒸馏水的体积比为 5 :80 :15,每次的加入量为5ml。
[0009] 步骤b所述的震荡时间为10_25min，离心条件为离心力4000g、离心时间8_20min。
[0010] 步骤c中的***每次的加入量为10ml。
[0011] 有益效果 其一、本发明提供的从植物中提取和测定血红素的方法能成功的从植物组织中提取血 红素，提取效果很稳定，可以在叶绿素合成调控机制的研究工作中发挥重要作用，解决了目 前动物血红素的提取研究得比较深入，已经可以实现规模化，产业化，而植物中的血红素含 量很低，提取困难，研究较少的问题。
[0012] 本发明仅采用一些常见试剂及紫外分光光度计，就可以测定植物样本中的血红素 含量，且结果比较可靠，完全可以满足实验室中的研究需要，不仅成本低，适宜推广应用，也 充分克服了目前植物中的血红素测定没有廉价且可靠的方法的技术问题。
【专利附图】
【附图说明】
[0013] 图1为血红素的分子结构示意图； 图2为叶绿素的分子结构示意图； 图3为血红素和叶绿素生物合成途径示意图； 图4为不同浓度的血红素标准供试溶液用紫外分光光度计在350-600nm范围内扫描 的情况； 图5为SPSS软件分析的血红素的标准曲线图。
【具体实施方式】
[0014] 一种从植物中提取和测定血红素的方法，包括以下步骤： 步骤一、植物血红素的提取 a. 准确称取待测植物的新鲜叶片lg，置于预冷的研钵中，加液氮研磨至粉末状，然后 转移至离心管中，加入***与蒸馏水的混合溶液I，震荡均匀后离心，弃去上清液，重复向 离心产物中加入***与蒸馏水的混合溶液I、震荡和离心操作，直至得到的离心产物为无 色，得到初级产物，备用；再向得到的初级产物中加入***与蒸馏水的混合溶液II，震荡均 匀后离心，弃去上清液，重复向离心产物中加入***与蒸馏水的混合溶液II、震荡和离心操 作，直至得到的离心产物为无色，得到次级产物，备用； 所述混合溶液I中***所占的比例大于混合溶液II中的比例； b. 在步骤a得到的次级产物中加入盐酸、***与蒸馏水的混合溶液，震荡均匀后离心， 收集上清液，备用；然后向离心得到的沉淀中再次加入盐酸、***与蒸馏水的混合溶液，震 荡均匀后离心，收集上清液，合并两次上清液，得到混合提取液，备用；