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文档介绍

文档介绍:一种hpv-e6蛋白的检测方法
一种hpv-e6蛋白的检测方法
本发明公开了一种HPV-E6蛋白的检测方法,包括配制HPV-E6蛋白反应剂、配制抗HPV-E6蛋白抗体试剂,将反应剂与抗体试剂混合和与恒定值校准液比较吸光值,计算出样本中H6蛋白抗体试剂;高特异性的抗HPV-E6蛋白与样品中相应的HPV-E6蛋白抗原反应,形成不溶性的抗原抗体
复合物,产生一定的浊度,其浊度的高低与样本中HPV-E6蛋白含量成正比,在规定波长下测定该不溶物抗原-抗体复合物的吸光值,与已知恒定的标准液比较,则可计算出样本中HPV-E6蛋白含量。
[0021]有益效果:本发明中样本无需稀释、操作简单、准确度高、重复性好、抗干扰能力强、适用于各种类型的全自动生化分析仪的特点。
【具体实施方式】
[0022]实施例1:
[0023]配制HPV-E6蛋白反应剂:取50ml浓度为5mmol/L磷酸盐缓冲液,以其作为基数,%叠氮钠、%%***化镁、%电解质***化钠和20%聚乙二醇2000混合;
[0024]配制抗HPV-E6蛋白抗体试剂:取20ml羊抗人HPV-E6蛋白抗血清,以其为基数,%的丁基羟基茴香醚和20%的***化镁混合;
[0025]将HPV-E6蛋白反应剂与抗HPV-E6蛋白抗体试剂按体积比3:1混合而成;
[0026]配制一提血清型恒定值校准液:取浓度为20mmol/L的二甘氨酸50ml,加入其体积1%的叠氮钠、?10mmol/L,5%的乙二***四乙酸二钠、?40mmol/L ;
[0027]在340nm波长下测定HPV-E6蛋白反应剂与抗HPV-E6蛋白抗体试剂混合液的吸光值,与一提血清型恒定值校准液比较,计算出样本中HPV-E6蛋白含量。
[0028]实施例2:
[0029]配制HPV-E6蛋白反应剂:取60ml浓度为40mmol/L三羟***氨基甲烷缓冲液,以其作为基数,%对羟基苯甲酸、%乙二醇、5%电解质***化钠和25%聚乙二醇4000混合,%非离子表面活性剂和2%***;
[0030]配制抗HPV-E6蛋白抗体试剂:取30ml马抗人HPV-E6蛋白抗血清,以其为基数,力口入其重量1%的硫代二丙酸二月桂酯和25%的乙二醇混合;[0031 ] 将HPV-E6蛋白反应剂与抗HPV-E6蛋白抗体试剂按体积比10:1混合而成;
[0032]配制一提血清型恒定值校准液:取浓度为30mmol/L的双甘氨酸60ml,加入其体积2%的对轻基苯甲酸、浓度为lmmol/L,8%的***化镁、浓度为5mmol/L ;
[0033]在340nm波长下测定HPV-E6蛋白反应剂与抗HPV-E6蛋白抗体试剂混合液的吸光值,与一提血清型恒定值校准液比较,计算出样本中HPV-E6蛋白含量。
[0034]实施例3:
[0035]配制HPV-E6蛋白反应剂:取70ml浓度为80mmol/LPIPES缓冲液,以其作为基数,加入其重量1%苯酚、%海藻糖、10%电解质***化钠和30%聚乙二醇6000混合;
[0036]配制抗HPV-E6蛋白抗体试剂:取40ml鼠抗人HP