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实验四血凝及血凝抑制实验.ppt

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实验四血凝及血凝抑制实验.ppt

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实验四血凝及血凝抑制实验.ppt

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文档介绍

文档介绍:实验四 血凝及血凝抑制实验
整理课件
实验目的


,了解其实用价值
整理课件
实验原理
凝集试验:颗粒性抗原与相应抗体结合后发生5ul1%的鸡红细胞悬液,震荡,室温静止感作15-30min,每5min观察一次结果。
,稀释使成为四价备用.
以出现十十血凝的血凝素最高稀释度为其血凝效价,即为1个血凝单位,实验时采用4个血凝素单位,例如血凝素效价为1∶320,为1个单位,4个单位即为1∶80稀释。下面前经校对取4个血凝单位用于实验
整理课件
血凝试验结果判定
效价判定:
凝集特别显著:“++++”
凝集现象次之:“+++”
凝集清楚可见:“++”
稍显凝集者:“+”
血凝效价:呈“++”凝集时的最高稀释度。此时的稀释度即为1个血凝单位。
整理课件
结果判定
,按下列标准判定

血凝反应强度示意图
“4+” 红细胞呈片状凝集,均匀布满孔底,边缘有时不整齐或皱缩。
“3+” 红细胞呈片状凝集,但面积略小于“4+”。
“2+” 红细胞呈片状凝集,但有少许沉积孔底中部呈小圆点状。
“+” 红细胞大部分沉于孔底中央,周围有少量散在凝集颗粒。
“-” 红细胞均沉于孔底呈小圆点状,边缘整齐。
,红细胞凝集100%的稀释度为判定血凝价的终点。凡能使鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数为病毒的凝集价。
整理课件
血凝抑制
,在第1排1-10孔内加入25ul生理盐水,第11孔不加。第12孔加25ul生理盐水。
,混匀后吸出25ul加入第2孔内,再混匀后吸出25ul加入第3孔内,依次类推至第10孔时弃掉25ul。第12孔不加作阴性对照孔。
整理课件
整理课件
-12孔内均加入“四价”血凝素25ul,震荡后,室温静止作用5min。
-12 孔内均加入1%的鸡红细胞悬液25ul,震荡,室温感作15-30min,每5min观察一次结果。
,记录实验数据.
整理课件
血凝抑制试验结果判定
测定孔 RBC沉于孔底中心,呈纽扣状。(+)
凝集 (-)
病毒对照孔:凝集
RBC对照孔:无自凝
血凝抑制试验效价:呈完全血凝抑制的最高血清稀释度。
整理课件
整理课件
整理课件
思考问题
、血凝抑制价


? 血凝抑制实验是不是特异的抗原抗体反应? 为什么?
整理课件
孔号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11(+)
12(-)
HA
稀释度
2
4
8
16
32
64
128
256
、、
、、

生理盐
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
x
25
血凝素
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25血凝素
x
生理盐水
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
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25
1%鸡红细胞
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25
25
25
25
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25
25
25
25
结果预测
++++
++++
++++
++++
++++
+++
++
+
-
-
++++
_
孔号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11(+)
12(-)
HI
稀释度
2
4
8
16
32
64
128
256
、、
、、

生理盐
25
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25
25
25
25
25
25
25
25
X
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待检血清
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25
25
25
25
25
25
25
25
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x
4HA血凝素
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25
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1%鸡红细胞
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结果预测
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