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基因扩增PCR实验室.docx

上传人:雨林书屋 2022/6/28 文件大小:235 KB

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基因扩增PCR实验室.docx

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文档介绍

文档介绍:基因扩增(PCR)实验室
、器具、仪器和设施为该区专用,不得
交错使用。
PCR实验室各地域功能:
:扩增试剂的制备、试剂的分装和扩
增反应混杂液的制备以及离心管、吸头等消耗品的储蓄和准备。
:样品登记、办理和分装;核酸(RNA/DNA)
提取、保存和使用;PCR扩增的第一轮加样。关于涉及样本的操作应
吻合生物安全二级实验室防备标准或更高。
:cDNA合成和DNA扩增。如果在此区进行套
式PCR的第二轮加样,应在PCR防备罩内进行。
:扩增产物的电泳、杂交、成像、序列
测定、变性高效液相解析、结果解析、登记及报告。
工作地域设施和仪器的配置。

2-8℃和-20℃以下的冰箱、普通离心计、超净工作台、混匀器、
微量加样器(覆盖μL),消耗品(一次性手套、耐高压办理的离心管
和加样吸头)、专用工作服工作鞋(套)、专用办公用品和荒弃物容器、
可移动紫外线灯。

2-8℃冰箱、-20℃(或-80℃)冰箱,生物安全柜、高速制冷离
心计(台式)、混匀器、恒温水浴箱或加热模块、制冰器或制冷模块、
微量加样器、消耗品(一次性手套、耐高压办理的离心管和加样吸头)、
专用工作服工作鞋(套)、上下水设施、专用办公用品和荒弃物容器、
紫外线杀菌灯。如需办理大分子的DNA应拥有超声波水浴仪。

核酸扩增仪、微量加样器、消耗品(一次性手套、耐高压办理的
离心管和加样吸头)、专用工作服工作鞋(套)、专用办公用品和荒弃
物容器、紫外线杀菌灯。

视查验方法不同而定,基本配置如下:电泳仪、电泳槽、摄影/
像设施、变性高效液相解析仪、测序仪、紫外透射仪、普通冰箱、离
心计、恒温水浴、微波炉、上下水设施、紫外线灯、微量加样器、消
耗品(一次性手套、耐高压办理的离心管和加样吸头)、专用工作服
工作鞋(套)、专用办公用品和荒弃物容器。
各地域设施和仪器的配备,应根据使用的扩增检测技术或试剂特
点,对设施和仪器进行必要的增减。
PCR实验室单向流流向制度
:试剂储蓄和准备区→
样品制备区→扩增区→扩增产物解析区,不得逆向流动。扩增前区保
持微(弱)正压状态,扩增后区保持微(弱)负压状态。
:试剂储蓄和准备区→
样品制备区→扩增区→扩增产物解析区,不得逆向进行。实验用品包
括实验材料(试剂、样品和扩增产物)、实验器材(容器、板架、实
验衣饰、帽子、口罩、手套、鞋套)、办公用品(记录纸、笔)、以及
清洁工具等。物品的传送是经过互锁式传达窗传达。
:进入各工作地域严格
按照试剂储蓄和准备区→样品制备区→扩增区→扩增产物解析区单
一方向进行,不得逆向走动。原则上实验人员应在扩增后区工作后当
天不得再返回扩增前区工作。在标本制备区由于加样的操作中可能会
发生气溶胶污染,所以应防备或减少在本区内不必要的走动。
:试剂储蓄和准备区→
样品制备区→扩增区→扩增产物解析区的方向进行。不同的实验地域
应该有各自的清洁用具,以防备交错污染。
PCR实验室工作基本源则和实验室各地域工作注意事项
;各地域必须有明确的标记,只
用于特定的操作,不得从事其他工作;不同地域的设施物品(仪器、
设施、材料、清洁工具),不得交错使用。
(比方不同颜色),工作人
员走动工作地域时,不得将工作服带出。
、耗材、样品以及盛放污染物的容
器。