文档介绍：[血栓性状与急性肺栓塞相关性的动物实验研究] 肺栓塞
摘要：目的 将兔静脉血在体外自然凝固制成栓子，视察不同时间组血栓性状与肺栓塞(PE)的相关性。方法 将24只家兔随机分成两组，分别注入体外凝固20 min栓子in组)，每组12只。 ．2 动物模型的建立 ①麻醉：3．5％苯巴比妥钠按150mg／kg～200 mg／kg比例兔腹腔注射。②固定：将麻醉满足后的兔四肢固定于手术台上，建立静脉通道，生理盐水缓慢静脉滴入，左腹股沟切皮，暴露血管，用穿刺针行股静脉穿刺，入导丝、导管鞘。③栓子的制备：两组分别从鞘管采血6 mL，置于10ml注射器中，将空气排空后分别静止20 min、60min。④取材：分别取20 min、60 min栓子0．1 mL固定于2．5％戊二醛溶液中。⑤造影：经导管鞘入导管至右房，注入造影剂，每次5mL，视察血栓栓塞前后肺动脉血管床的造影剂分布状况。⑥注入血栓：将制备的血栓经导管注入，每次注入0．5mL并注盐水冲管，反复注入直至动物出现呛咳、挣扎、呼吸急促或注入时达4．5 mL为止。 1．3光镜视察 将肺小动脉内血栓从10％甲醛溶液中取出，常规方法进行石蜡包埋、切片、HE染色视察。 1．4透射电镜视察 ①体外血栓0．1 mL固定于2．5％戊二醛溶液中24 h(4℃)；②在pH 7．4磷酸缓冲液中冲洗12h，更换3次(4℃)；③1％锇酸作用后固定12 h；④去离子水冲洗3次；⑤用***逐级脱水；⑥组织块#618环氧树脂包埋剂中浸透12h(室温)；⑦把浸透好的组织块置于1号医用胶囊中，用618包埋剂进行包埋；⑧将包埋好的包埋块置于35℃温箱中聚合24h，60℃温箱中聚合24 h；⑨切片视察。 2结果 2．1肺动脉造影20 min组均未发生肺栓塞；60 min组除2例因过量死亡后，余10只均发生肺栓塞。 2．2大体视察 右心房内注入血栓后，视察8 min，试验结束后取肺，分别肺动脉，沿肺动脉切开，其中2只兔注入血栓后未视察至5h死亡。切开视察见右室及肺动脉主干内大量栓子。取出栓子见条索状、长约(0．3～10．0)cm不等，多量积聚于血管内，或条形栓子骑跨动脉分支处。 2．3光镜视察 栓塞后肺小动脉内栓子，形态不规则；血栓与动脉壁无结合；栓子断面可见混合性血栓与灶性白色血栓成分。 2．4电镜视察 20min组体外栓子：大量红细胞四周可见血浆呈电子密度匀称的絮状物质，内含束状分布的体积较大的纤维蛋白成分；纤维蛋白丝密集排列，结构清晰；也可见少量的血栓凝集物；凝集物中纤维蛋白交织成网。60min组体外栓子：纤维蛋白成分呈小短杆状，血浆基质成分凝合，部分区域为电子透亮区；纤维蛋白丝疏松排列，部分区域结构不清，呈溶解的细沙状或凝集的电子致密斑块；也可见少量的血栓凝集物，纤维蛋白成分少。以上两组不同时间体外栓子电镜视察结果显示：纤维蛋白的形态不同；纤维蛋白丝的数量不同；血栓凝集物的纤维蛋白含量不同。 3探讨 本试验结果显示，以兔自体静脉血在体外未加人为干扰因素而自然凝固，并模拟下腔静脉系统的栓子从右心房进入右心室，再进入肺动脉并将其栓塞，建立试验动物模型表明，其方法的采纳更接近机体的病理生理过程。不同时间的凝固血块作为栓子对肺动脉血流影响不同。20min组栓子