文档介绍：1 HPLC 法测定阿莫西林颗粒剂的含量及有关物质作者:洪建文李趣嫦王彦蝶【摘要】目的建立阿莫西林颗粒剂中阿莫西林的含量测定及有关物质检查的方法。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以 mol/L 磷酸二氢钾溶液( pH 值 )拟乙腈( 体积比 ∶ ) 为含量测定的流动相;以 mol/ L 磷酸二氢钾溶液( pH 值 )拟乙腈(体积比 99∶1 )为流动相 A, 磷酸二氢钾溶液( )拟乙腈( 体积比 80∶ 20) 为流动相 B, 梯度洗脱检查有关物质, 检测波长 230 nm ,柱温 30℃,流速 mL/min 。结果阿莫西林分别在 ~1 mg/mL(r= 9, n=7) 与 ~ mg/mL(r= 8, n=5) 范围内与峰面积线性关系良好,低、中、高 3 个浓度的回收率分别为 % 、 % 和 %(RSD=% , n=9) 。阿莫西林有关物质检查的检测限为2 ng ,且主成分与有关杂质均能有效分离。结论本文建立的含量测定方法快速、准确、重现性好, 有关物质检查方法专属、灵敏,可用于阿莫西林颗粒剂的质量控制。 2 【关键词】阿莫西林颗粒剂含量测定有关物质高效液相色谱法阿莫西林颗粒剂是香港联邦制药厂有限公司产品,是广谱半合成青霉素类抗生素,具有疗效好、不易致过敏等优点, 广泛应用于儿童呼吸系统、泌尿生殖系统、消化系统感染。阿莫西林颗粒剂现行质量标准为进口药品注册标准。该标准采用选择性较差, 影响因素较多, 试剂配制繁杂且有一定毒害,操作步骤也较繁琐的紫外分光光度法进行含量测定,未进行有关物质的检查。该制剂在《国家药品标准》化学药品地方标准第二册中有收载, 也未进行有关物质检查。作为儿童药品,为了更好地控制本产品质量,提高进口注册标准, 保证产品的疗效, 本文采用高效液相色谱法[ 1-4 ] 对阿莫西林颗粒剂中阿莫西林的含量及有关物质进行研究, 建立了快速、准确、重现性好的含量测定方法及专属、灵敏的有关物质检查方法,可更好用于本品的质量控制。 1 仪器与试药 Agilent1100 高效液相色谱仪, Agilent1200 高效液相色谱仪, Sartorius BP211D 万分之一电子天平。 3 阿莫西林对照品( 中国药品生物制品检定所,批号为 130409 拟 200609 ,纯度为 % ,供含量测定用) ,阿莫西林颗粒剂(香港联邦制药厂有限公司,批号为 17345 、 17374 、 17146 、 17155 , 规格: g/包), 乙腈( 色谱纯), 磷酸二氢钾、氢氧化钾、氢氧化钠( 分析纯), 水为超纯水。 2 方法与结果 检测波长的选择取样品适量,加流动相溶解并稀释,在波长 200 ~ 300 nm 之间进行紫外扫描, 结果阿莫西林在 230 nm 波长处有最大吸收, 同时杂质在 230 nm 也有较大响应。因此选择 230 nm 为本法的检测波长。 含量测定 色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂, mol/L 磷酸二氢钾溶液(用 2 mol/L 的氢氧化钾调节 pH 值至 )拟乙腈( 体积比 ∶ ) 为流动相, 流速为 mL · min-1 , 检测波长为 230 nm , 柱温 30℃, 进样量 20μL。 4 色谱结果见图 1。 A. 对照品;B. 样品图1 阿莫西林颗粒剂含量测定的 HPLC 色谱图(略) Figure 1 HPLC of amoxicillin 溶液的制备对照品溶液:精密称取阿莫西林对照品适量,加流动相制成每 1 mL 含 mg 的溶液,即得。供试品溶液:取装量差异项下的内容物,研细,精密称取粉末适量, 加流动相溶解并定量稀释成每1mL含 mg 的溶液,滤过,取续滤液,即得。 专属性试验取空白辅料按“ ”项方法制备溶液, 进样测定。结果表明空白辅料对样品测定无干扰。将供试品在 60℃温度下放置 10d, 于第 10 天取样,按“ ”项方法制备溶液, 进样测定。结果表明本品经高温加速实验后, 杂质总数和总量均有所增加, 主成分与各种分解产物完全分离。将供试品在相对湿度 92. 5% ( KNO3 饱和溶液) ,温度 35℃下放置 10d ,于第 10 天取样,按“ ”项方法制备溶 5 液, 进样测定。结果表明本品经高湿加速实验后, 杂质总数和总量均有所增加, 主成分与各种分解产物完全分离。色谱图见图 2。 A. 空白辅料;B. 高温降解;C. 高湿降