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β胡萝卜素β-Carotene酶联免疫分析.docx

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β胡萝卜素β-Carotene酶联免疫分析.docx

上传人:百里登峰 2022/6/28 文件大小:20 KB

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文档介绍

文档介绍:(3 —胡萝卜素(6 -Carotene)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
22pg/ml-850pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定玉米样本中 3 —胡萝卜素(3 -Caroten(3 —胡萝卜素(6 -Carotene)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
22pg/ml-850pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定玉米样本中 3 —胡萝卜素(3 -Carotene)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 3 —胡萝卜素(3 -Carotene)水平。用纯化的3
一胡萝卜素(6-Carotene)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 3 —胡萝卜素(3 -Carotene),再与HRP标记的3 —胡萝卜素(3 -Carotene)抗体结合,形 成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化
下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。 颜色的深浅和样品中的 6 —胡萝卜素(6
-Carotene)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算
样品中3 —胡萝卜素(3 -Carotene)浓度。 试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml X 1 瓶
7
终止液
6ml x 1 瓶
2
酶标试剂
6ml X 1 瓶
8
标准品(1600pg/ml)
X 1 瓶
3
酶标包被板
12孔X 8条
9
标准品稀释液
X 1 瓶
4
样品稀释液
6ml x 1 瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml x 1 瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml x 1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于 -20 C保存,但应避免反复冻融
不能检测含 NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
800pg/ml
5号标准品
150 U
的原倍标准品加入150 pl标准品稀释液
400pg/ml
4号标准品
150 U
的5号标准品加入150标准品稀释液
200pg/ml
3号标准品
150 U
的4号标准品加入150标准品稀释液
100pg/ml
2号标准品
150 U
的3号标准品加入150标准品稀释液
50pg/ml
1号标准品
150 U
的2号标准品加入150标准品稀释液
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂, 其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50此待测样品孔中先加样品稀释液 40此
然后再加待测样品10 U (样品最终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置 37 C温育30分钟。
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸储水 30倍稀释后备