文档介绍:实验一布氏杆菌病的检疫
实验目的。、判定。
实验材料
教学录像结合教师演示操作
器材:中试实验一布氏杆菌病的检疫
实验目的。、判定。
实验材料
教学录像结合教师演示操作
器材:中试管、玻璃板、微量移液器、
5ml吸管、tip头等。
试剂:布氏杆菌病试管凝集抗原,阳、阴性血清;
布氏杆菌虎红平板板凝集抗原,阳、阴性
血清;新鲜牛血清,%石碳酸生理盐水;
实验原理
布氏杆菌病的血清学检验方法中以凝集试验最为常用,机体感染后1周即产生凝集抗体,一般流产后1-2周达最高,经半年开始下降,可持续2-4年,具体方法可采用试管凝集试验法和虎红平板凝集试验法。
实验方法----试管凝集试验骤
一、操作步骤
试管
稀释液ml
待检血清ml
1:20稀释抗原ml
稀释度
1
----
1:25
2
------
1:25
3
1:50
4
1:100
5
1:200
实验方法----试管凝集试验
二、制备比浊管
管号
1:20稀释抗原液ml
稀释液
ml
清亮度
%
标记
1
100
++++
2
75
+++
3
50
++
4
25
+
5
0
-
全部试管充分振荡后,置于37~38℃溫箱中,22~24小时后用比浊管对照检查记录结果,出现50%以上凝集的最高稀释度就是这份血清的凝集价。
试管凝集试验
结果判定:
血清凝集价为1:100以上,为阳性。
血清凝集价为1:50为可疑,可疑反应的家畜经3~4周重检,仍为可疑者判为阳性。
注意事项
试管凝集试验,可出现非特异性反应:
I)假阴性
原因: ① 检查时,动物处于潜伏期;
② 幼年畜,细菌在局部淋巴结,
活动受限制,抗体滴度低。
③ 母畜怀孕后期,母源抗体随血
液循环至乳腺排出。
④ 布鲁氏菌病慢性,长期刺激,
动物对抗原不敏感,故抗体滴
度不高。
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