文档介绍：1 二恶英及其类似物Ⅲ食品测定方法食品中 PCDD/Fs 分析属超痕量(pg-fg) 、多组分( 同系物、异构体的分离) 和复杂前处理技术, 对特异性、选择性和灵敏度的要求极高,成为当今食品和环境分析领域的难点。目前仅在发达国家的少数实验室能够开展。 WHO 指出仅有约 100 个实验室具备检测能力。〔1〕超痕量分析是因二恶英在环境样品中水平极低, WHO 规定的 TDI 为1~ 4pg/kgBW ; 〔2 〕相应要求食品中 PCDD/Fs 测定方法的检测限以脂肪计低于 1pg/g( 甚至为 fg/g 水平的测定), 不到其它污染物含量的 1/1000 。所谓多组分是指 PCDD/Fs 中各同系物、异构体的毒性相差很大, 具毒性的 17种 2,3,7,8- 取代 PCDD/Fs 具有毒性, 进行危险性评价时需选择性测定。而 PCDD/Fs 共有 210 个同系物、异构体,加上 209 个 PCBs ,共有 419 个二恶英及其类似物。另外, 试样在进行仪器分析前要浓缩至 1/1000 、 1/10000 ,提取液中的 PCDD/Fs 比其共提取物和基质中同系物及其它氯代化合物等干扰组分低得多, 使得这一超痕量分析极为困难。只有良好的净化技术及特异性的分离手段才能满足要求。〔3~5 〕为保证分析质量,国际组织及有关国家建立了官方分析方法与指南, 如国际癌症研究中心( IARC ) 〔4〕、欧盟的公共标准局〔 6〕、美国环境保护局(EPA) 〔7, 2 8 〕和美国食品药品管理局(FDA) 。〔9〕 FAO/WHO 食品法典委员会正在着手建立食品二恶英限量标准和相应检验方法, 起草人认为高分辨气相色谱与高分辨质谱联用技术( HRGC-HRMS )是目前唯一适用的的化学方法。而用 DNA 重组技术建立的生物学方法在二恶英总 TEQ 水平测定可达到特异性、选择性和灵敏度的要求, 且所测结果与 HRGC-HRMS 方法相当,可作为大量样品筛选手段。〔 10〕 1 气相色谱与质谱联用的化学分析方法 PCDD/Fs 的化学分析有两种不同的方案,一为分析所有 PCDD/Fs , 目的在于了解各化合物的分布形式, 鉴定其可能的来源;另一为仅测定 2,3,7,8- 取代的 17种 PCDD/Fs 。后一方法较完善, 以美国 EPA161 3 方法为代表的 HRGC-HRM S 方法已成为各国公认的仲裁方法。本文主要以此为基础对这一领域的进展作简要综述。 3 环境及生物材料中 PCDD/F s 的分析主要包括5 个方面, 即:样品采集、提取、净化、分离及定量测定。〔4,6〕 样品采集〔 4,6〕与有机氯农药残留检测方法相似,但 PCDD/Fs 应更注意安全操作和避免试验过程中的污染。 PCDD/Fs 具有光解作用, 尤其在溶液中低氯代化合物光解作用更为迅速。故样品应避光、低温保存。样品的取样量依样品类型、污染水平、潜在干扰物质与方法的检测限而定。一般样品为 1~ 50g ,对于含脂低、污染轻的样品必要时可增加到 100 ~ 1000g 。 提取〔 4~ 10〕提取前,加入 13C 或 37Cl 标记的内标,用以测定提取净化效率与矫正分析丢失。 PCDD/F s 的提取方法与有机氯农药残留检测方法相似,包括溶解、振摇、混匀、超声或索氏提取。提取步骤和溶剂选择取决于样品类型和净化方法。如脂肪和油可采用二氯甲烷+ 已烷( 1+1 ) 直接提取; 其它食品可使用不同比例的提取溶剂, 采用包括 4 索氏提取在内的各种提取方法。许多实验室对比试验已经表明鱼、猪脂肪、牛奶、母乳、人血和脂肪组织所用各种提取方法回收率的可接受性。〔 11~ 15〕作为新技术使用 CO2 为流体的超临界流体提取方法,也用于生物样品中 PCDD/Fs 的提取。〔 16〕 净化净化目的是除去共提取物中的干扰组分, 净化程度取决于被测组分的数目、基质干扰及 GC-MS 状态。目前大多采用色谱法进行净化, 包括吸附、分配与排阻色谱。一系列色谱柱,如硅胶加化学改性吸附剂(用硫酸、 KOH 、 CsOH 处理的硅藻土及硅胶)、 Florisil 、氧化铝、活性碳等, 常被串联使用,多层色谱联用柱也日益普及。〔 17〕根据样品类型选择适当的净化方法,存在大量共提取物时需要进行预处理。包括酸或碱洗, 如用硫酸处理消除油脂等干扰组分;硅胶柱可吸附脂质及油脂成分,用硫酸、氢氧化钠和硝酸银浸泡处理的多层硅胶柱进行洗脱; 凝胶渗透色谱也被用来去除脂肪和其它分子量相对较高的化合物。 5 〔4,5〕微型氧化铝柱(用一次性玻璃滴管装柱)可除去提取液中弱极性的氯代苯、多氯联苯与联三苯和多氯代二苯醚, 这些物质被二氯甲烷+ 正己烷( 1+50 )首先洗脱出来,留置柱上的 PCDD/Fs 再用二