最新微生物实验报告(00001).doc

文档介绍：微生物实验报告
微生物学大实验
班级：
姓名：
学号：

，沥干。
〔2〕整理：清理桌面。

结果总体上来说算不错，穿刺线形状如玻璃棒，有扩散现象；边缘不整齐，这说明了大肠杆菌有鞭毛，可运动。

〔1〕半固体培养基琼脂的用量依据琼脂牌号不同而定的。其硬度的判断，以培养
3. 大肠杆菌菌种别离的三种方法〔平板划线法、平板涂布法和倾注法〕


了解平板划线法别离菌种的根本原理，并熟练掌握其操作方法。

平板划线法是指把杂菌样品通过在平板外表划线稀释而获得单菌落的方法。一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板外表上作屡次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。通常认为这种单菌落就是某微生物的纯种。实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可以形成一个单菌落，故在科学研究中，特别在遗传学实验或菌种鉴定工作中，必须对实验菌种的单菌落进行屡次划线别离，才可获得可靠的纯种。
具体的划线形式有多种，现在主要说一种，将一个平板分成A、B、C、D4个面积不同的小区进行划线，A区面积最小，作为待别离菌的菌源区，B和C为经过初步划线稀释的过渡区，D区那么是关键的单菌落收获区，它的面积最大，出现单菌落的概率也最高。由此可见，这4个区的面积安排应该做到D>C>B>A。

1、倒平板
将冷却至50℃左右的培养基按无菌操作的方法倒入平板中，平置，待凝。
2、做分区标记
在皿底用笔划出4个不同面积的区域，使D>C>B>A，且各区的夹角应为120°左右，以便使D区与A区所划出来的线条平行、美观。
3、划线操作
〔1〕挑取菌样：选用平整圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量含菌试样。
〔2〕先划A区：将平板倒置于煤气灯旁，用左手取出平板的皿底，使平板外表大致垂直于桌面，并让平板面向火焰。右手持含菌的接种环，先在A区轻巧地划上3-4条连续的平行线当作初步稀释的菌源。烧去接种环上的剩余菌样。
〔3〕划其余区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转至划线位置，把接种环通过A区而移至B区，随即在B区轻巧地划上6—7条致密的平行线，接着再以同样的操作在C区和D区划上更多的平行线，并使D区的线条与A区平行〔但不能与A或B区线条接触〕，最后，将左手所持皿底放回皿盖中。烧去接种环上的残菌。
5、恒温培养
将划线后的平板至28℃倒置培养2-3d。
6、挑单菌落
良好的结果应该在C区出现局部单菌落。而在D区出现较多独立分布的单菌落。然后从典型的单菌落中挑取少量菌体至试管斜面，经培养后即为初步别离的纯种。
7、清洗培养皿
将废弃的带菌平板作煮沸杀菌后进行清洗、晾干。

有A、B、C、D四个区，且D区有单菌落出现，实验结果很好。

〔1〕为了取得良好的划线效果，可事先用原纸垫在空的培养皿内划上4个区，并用接种环练****划线动作，待通过模拟实验后熟练操作与掌握划线要领，再进行正式平板划线。
〔2〕用于划线的接种环，环柄宜长些〔约10cm〕，环口应十分圆滑，划线时环口与平板间的夹角宜小些，动作要轻巧，以防划破平板。
〔3〕用于平板划线的培养基，琼脂含量宜高些〔2%左右〕，否那么会因平板太软而被划破。
(4)平板不能倒得太薄，最好在使用前一天倒好。为防止平板外表产生冷凝水，倒平板前的培养基温度不能太高。


了解用浇注平板法和涂布平板法别离微生物纯种的原理，并掌握有关的具体操作方法。

浇注平板法和涂布平板法是两种最常用的菌种别离纯化方法，它们不仅可用于别离纯化，还可用于计数等。浇注平板法是将待别离的试样用生理盐水等稀释液作梯度系列稀释后，取其中一适宜稀释度的少量菌悬液加至无菌培养皿中，立即倒入融化的固体培养基，经充分混匀后，置适温下培养。最后可从其外表和内层出现的许多单菌落中，选取典型代表，将其转移到斜面上培养后保存，此即为初步别离的纯种。
涂布平板法是指取少量梯度稀释菌落，置于已凝固的无菌平板培养基外表，然后用无菌的涂布玻棒把菌液均匀地涂布在