文档介绍:GenEscortTMⅠ使用说明.
GenEscortTMⅠ使用说明.
GenEscortTMⅠ使用说明.
GenEscortTMⅠ使用说明
一.产品介绍
GenEscortTMI是针对一些常用贴壁细胞体内转染试验中,动物肿瘤模型的成立需要根据研究情况进行选择;核酸的给药剂量可根据需要进行调整,其与GenEscortTMⅠ的使用比率最好经过体外细胞水平的实验确定,但往常DNA/RNA/siRNA/(μg):GenEscortTMⅠ(μl)1:2-1:3;核酸的给药途径可根据研究情况确定,可选择静脉注射、肌内注射、瘤内注射、腹腔注射等。
5.PBS配制方法
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800ml蒸馏水中溶解8gNaCl,,.
12H2O(或
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),
1L,高压灭菌20分钟,保留于室温。(见“分子克隆实验指南”
第二版
P927)
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四.操作步骤贴壁细胞转染
(以24孔板转染为例)
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1μgDNA质粒稀释于50μ不l含血清和抗生素的培养基中,轻轻混匀。
注:PBS()缓冲液,即前述细胞培养室常用的
PBS
以及optiMEM(Invitrogen)
也能
用于稀释DNA和转染试剂。
TMⅠ稀释于
50μl不含血清和抗生素的培养基中,轻轻混匀。
?2μlGenEscort
注:PBS()缓冲液,即前述细胞培养室常用的
PBS
以及optiMEM(Invitrogen)
也能
用于稀释转染试剂和DNA。
TM
50μlDNA稀释液中,轻轻混匀,室温孵育
10-15
分钟,
?50μlGenEscortⅠ稀释液滴加到
TM
Ⅰ/DNA
复合物。
进而获得100μlGenEscort
为简化操作,在充分注意实时混匀的前提下,
前面几步能够归并为一步达成:将1μgDNA质
粒稀释于100μl不含血清和抗生素的培养基或
PBS中,轻轻混匀,然后加入
2
μlGenEscortTMⅠ后立刻混匀,室温放置
10-15min,获得100μ转l染复合物。
注意!:两种溶液的混淆次序对转染结果特别重要,切勿颠倒次序。同时室温孵育时间最好
不超过20分钟,然后立刻加入到